SRY基因在性别鉴定中的应用.ppt

  1. 1、本文档共20页,可阅读全部内容。
  2. 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
;二、实验目的 ;二、实验原理 ;SRY基因(sex-related Y);PCR技术原理;Yp11.3;基因组DNA的提取;磁珠法提取DNA试剂盒 磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。 快速简捷,一般可在36分钟内完成。 · 不用多次漂洗磁珠也可确保高纯度,提取出的基因组DNA OD260/OD280典型的比值达1.7-1.9, 长度可达2 0 k b - 5 0 k b,可直接用于P C R、Southern-blot和各种酶切反应。;;1.样品处理;2.将上述离心管振荡混匀,65 ℃水浴20min,间或混匀,使样品充分裂解。 3.向充分裂解的样品加入400μl Buffer MA和10μl Magicmag beads,振荡混匀10s. (吸取Magicmag beads之前,先混匀。务必将Magicmag beads加至液面以下) 4.将离心管置于磁力架上,待Magicmag beads完全吸至管壁上之后,吸弃上清,从磁力架取出离心管。 (吸弃上清时,不要吸入Magicmag beads) ;;磁珠法提取DNA ;;基因组DNA的提取;;;(2)每个样品反应体系为25μl。 首先将下列成分预混: 10×PCR缓冲液 5μl 25mM MgCl2 4 μl 2.5mmol/L dNTP 4μl 10 umol/L SRY引物 1 2μl 10 umol/L SRY引物2 2μl 1 U/μl Taq酶溶液 1μl ddH2O 26μl 共44ul。 将上述成分混合均匀; 分装到2只0.2 ml离心管中(22μl/管); 一管加入3μl男生DNA,另一管加入3μl女生DNA。 ;(3)PCR反应条件为: 94℃ 3min 94℃ 30s 50℃ 30s 循环35次 72℃ 30s 72℃ 5min 10℃ ∞ ?;

文档评论(0)

清风老月 + 关注
官方认证
内容提供者

该用户很懒,什么也没介绍

认证主体阳春市惠兴图文设计有限公司
IP属地广东
统一社会信用代码/组织机构代码
91441781MA53BEWA2D

1亿VIP精品文档

相关文档