药敏试验及药敏试验结果分析.ppt

D. 大肠埃希菌：所有氨基青霉素 R，阿莫西林/克拉维酸 R/氨苄西林/舒巴坦 R，所有一代头孢菌素 R，所有羧基青霉素/所有脲基青霉素 R/I，所有三代头孢菌素S，说明耐药性由内在低水平头孢菌素和/或高水平获得性β-内酰胺酶引起，使青霉素、青霉素/酶抑制剂，二代头孢菌素的活性降低。结果修正为所有青霉素 R，所有青霉素/酶抑制剂 R/I。 第六十二页，共八十五页。 E. 奇异变形杆菌、沙门菌：所有氨基青霉素 R，所有三代头孢菌素 S。修正结果为：所有青霉素 R，所有一代头孢菌素 R/I。 F. ESBL型大肠埃希菌，结果修正为所有青霉素 R，所有头孢菌素，除头霉素外 R，氨曲南 R。 第六十三页，共八十五页。 问题菌和耐药机制 有些菌无标准化的药敏试验 棒杆菌、芽胞杆菌、气单胞菌、巴斯德菌 某些耐药机制需要多种检测方法 诱导型：VanB, Bush I型酶 MRS的异质型表达 ESBL 药敏可能无法检出新出现的耐药，VISA 第三十页，共八十五页。 药敏试验方法2－肉汤稀释法 4 8 16 32 64 128 256 ug/ml 混 混 清 抗生素倍比稀释，种菌105CFU/ml ， 孵育35℃， 16-20h，判读 第三十一页，共八十五页。 药敏试验方法2－肉汤稀释法 调节离子浓度的MH肉汤 宏量肉汤法（2ml, 13x100mm ） 微量肉汤法 （ 0.1ml, 微量板） 自动化仪 优点：准确，可靠，可用于研究 缺点： 劳动强度大 细菌生长情况不可查 第三十二页，共八十五页。 药敏试验方法3－琼脂稀释法 浓度 16 32 64 128 256 ug/ml 制备含对倍抗生素浓度梯度的平板，制备菌悬液， 点种菌，104/每个点，孵育，判读结果 第三十三页，共八十五页。 药敏试验方法3－琼脂稀释法 优点：金标准 精确可靠 可同时测定多株菌（40株） 细菌生长情况可查 缺点： 测多个药时劳动强度大 制备平皿费时费力 第三十四页，共八十五页。 药敏试验方法4－E test 法 细菌生长区 E test 塑料 条 椭圆形 细菌生长 抑制区 256 128 8 016 判读抑菌浓度 （MIC ug/ml) 第三十五页，共八十五页。 药敏试验方法4－E test 法 优点 连续浓度梯度，与琼脂稀释法相关性好 影响因素少，稳定性高 操作简单，省时 缺点：昂贵 用途：快生长菌，苛养菌，厌氧菌，酵母菌， 分枝杆菌 第三十六页，共八十五页。 评价药物体外抗菌活性的指标 MIC50, MIC90, MIC 均值， MIC 范围，R，I，S MIC50/ MIC90：MIC从小到排列，位于第50 / 90百分位菌株的MIC值 单纯比较MIC50，MIC90是片面的，还要同时看平均MIC及MIC范围 同时结合R，I，S，（不同药物血浓度不同，安全范围不同〕 第三十七页，共八十五页。 抗生素 细 菌 人 体 RESISTANCE PHARMACODYNAMICS INFECTION IMMUNITY SIDE EFFECTS PHARMACOKINETICS 抗生素、细菌、人体 第三十八页，共八十五页。 第三十九页，共八十五页。 Time above MICCorrelation of serum pharmacokinetics with MIC (susceptibility)of an organism Time above MIC Time Antibiotic concentration (ug/ml) 2 Drug A Drug B A B Drug A present at concentration of 2 ug/ml for 50% of dosing interval Drug B present at concentration of 2 ug/ml for 30% of dosing interval 4 6 8 0 * * 第四十页，共八十五页。 Relationship between Time above MIC and efficacy in animal infection models 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 Time above MIC (%) Penicillins Cephalosporins Mortality after 4 days of therapy (%) Craig. Diagn Microbi