美白剂实验研究及临床应用PPT课件2.ppt

土曲菌素可刺激ERK和下调MITF，可抑制Mel-ab黑素细胞黑素合成 咪唑衍生物AVS-1357，可通过活化ERK和下调MITF、酪氨酸酶减少色素生成 Haginin A抑制酪氨酸酶并活化ERK，下调MITF、酪氨酸酶和TRP-1，降低棕色豚鼠和斑马鱼模型系统的色素沉着 2.5 调节黑素生成信号通路 1.研究方法 2.研究方向 3.美白剂的应用 3、美白剂的应用 氢醌(HQ)作为有效美白制剂曾广泛使用，但最近已被禁用，因为存在严重的安全问题：可能导致突变，增加非洲国家褐黄病的发生率。 曲酸、熊果苷和壬二酸常用 熊果苷是氢醌的糖基化形式，存在于熊果提取物中，也可由氢醌经(葡萄)糖苷酶作用来合成。 脱氧熊果苷是是去除熊果苷全部葡萄糖侧链中的羟基组制得，毒性明显低于熊果苷。 3、美白剂的应用 熊果提取物（β-熊果苷的自然来源）可能增强Meladerm和Lucederm制剂中α-熊果苷的作用。 桑椹和甘草活性成分具有酪氨酸酶抑制作用(TI)和色素减少(PI)的作用。 3、美白剂的应用 美白剂实验研究及临床应用 大连医科大学附属第二医院皮肤科 涂彩霞 1.研究方法 2.研究方向 3.美白剂的应用 1.主要研究方法 （1）美白活性成分分析 是指通过高效液相色谱等方法对美白化妆品中的美白活性物质进行种类和含量的测定。 1.主要研究方法 （2）细胞水平功效测定 检测内容：黑素含量测定、酪氨酸酶活性、蛋 白表达、mRNA水平测定、信号传导通路等。 1.主要研究方法 （2）细胞水平功效测定 1）细胞模型 B16黑素瘤细胞 大多数研究中，采用B16黑素瘤细胞检测色素抑制作用（PI） 1）细胞模型 melan-a或mel-ab黑素细胞或正常人黑素细胞(nHEM) 正常人黑素细胞(nHEM)更好的模拟体内环境，但黑素细胞更难维持培养。 源于小鼠或人皮肤的黑素细胞和角质形成细胞共培养更贴近体内环境，体外系统的皮肤等效模型（SEM）也用于皮肤美白研究。 2）主要实验方法 酪氨酸酶活性检测方法有放射性同位素法、免疫学法和生化酶学法，其中以生化酶学法较为简单成熟，如氧化多巴法。 细胞中色素含量测定是美白化学物功能评价的最重要检测指标。目前多采用生物化学-分光光度法测定黑素细胞中的黑素含量，此法经典稳定 。 2）主要实验方法 信号传导通路蛋白表达—Western Blot，免疫组化，流式细胞术，ELISA等 mRNA转录—Rt-PCR （3）动物实验 棕色豚鼠模型 黄棕色豚鼠皮肤黑素细胞和黑素小体的分布近似于人类，试验结果重复性好，常采用UV或α-MSH诱导色素沉着。 斑马鱼模型 对显示美白制剂体内毒性具有意义 （4）人体实验 视觉评分—主观性强，不精确 照相对比—受光线及拍摄条件的影响 FoToFinder dermoscope 仪，由摄像机和显微镜头组成，可以对色素沉着区进行拍照、放大，并进行图像处理，计算各种参数如皮损大小、边缘情况、结构参数，同时作出安全评价，是一种常用的色斑评价法。 （4）人体实验 三色分析法：通过检测皮肤表层结构上的紫外可见反射光，采用三维颜色空间分量的定量，来模拟并还原描述人肉眼所看到的物体的颜色，经过计算来综合评价皮肤的色度。 （4）人体实验 漫反射光谱法：针对皮肤颜色的特征性发色基团，如黑色素、血红蛋白等，选择特定波长扫描，测定皮肤表面的反射光谱，从而对皮肤中的血红蛋白和黑色素等进行定量，其测量参数能较好地从生理学上解释皮肤颜色的改变。 （4）人体实验 数字化成像定量技术是显微镜照相技术和计算机处理系统的结合，能够对色素沉着进行扫描并进行色度定量，经计算机处理系统进行数据信息的转换，可以计算得出各种发色团的含量，以此来综合评价皮肤色度的变化，从而可对化妆品的祛斑效果进行准确的定量评价。 1.研究方法 2.研究方向 3.美白剂的应用 2.主要研究方向 2.1 抑制酪氨酸酶活性及表达 2.2 抑制黑素向角质形成细胞转移 2.3 抑制氧化反应 2.4 抑制炎症反应 2.5 调节黑素生成信号通路 2.1 抑制酪氨酸酶活性或表达 4-羟基茴香醚：作为酪氨酸酶替代底物引起色素减退 针叶中提取茶多酚或从黑桑树中分离的查尔酮衍生物可抑制酪氨酸酶活性。 从大豆胚轴酒曲soygerm koji分离出来的两个8-羟基异黄酮： 具有不可逆抑制酪氨酸酶活性作用 面包树(Artocarpus incisus)或龙胆(根) (Sophora flavescens)分离的间苯二酚特有的侧基（与C4,