《食品毒理学》全套教学课件.ppt

二、化学物质行为毒性研究问题的提出 1973年，Jones和Smith报导了胎儿酒精综合征（fetal alcohol syndrome, FAS），即母亲在妊娠期间长期饮用酒精性饮料引起的胎儿异常综合征，包括特殊的面部畸形，出生前后功能发育障碍和中枢神经系统功能障碍。七十年代，Harada等首次报道了“胎儿水俣病”（fetal minamata），即母亲在妊娠期间接触甲基汞，影响胎儿的神经系统发育，导致胎儿出生后智力和运动功能发育障碍。 这些发现使人们认识到在化学物质安全性评价中，仅仅从形态学的改变来评价是不够的，而应对后代行为和功能的改变给予足够的重视。 二、化学物质行为毒性研究问题的提出 因此，自七十年代后期以来，行为毒理学尤其是方法学的研究得到了迅速的发展。 日本、英国相继在药品鉴定指南中明确指出，必须对后代进行行为方面如运动、学习、视觉等方面的检查。 欧洲经济共同体（EEC）也要求其成员国在化学物质安全性评价中，应做“无临床症状生殖和生长发育方面的毒性试验”。 八十年代，美国先后在新生产化学物质的安全性毒性评价试验方法指南中，增加了“行为功能观察指标测试试验（FOB）和活动量”等行为测试方法，把行为毒理学方法作为一种敏感的的化学物质安全性评价手段，逐渐列入化学物质安全性评价法规中。 这构成了化学物质安全性毒理学评价的第四个阶段。 二、化学物质行为毒性研究问题的提出 在1995年至1996年期间，以美国和加拿大两国为中心，并且有欧洲化学物质生态和毒理学中心（ECETOC）及美国工业卫生署（AIHC）协同参与下，成立了化学物质的安全性评价组织（OECD），于1996年撰写出有关进行神经毒性试验方法指南的初稿。 1998年3月30日至4月1日，召开了国际OECD神经行为毒性的研讨会。会上着重讨论了神经毒性的评价原则及其试验方法，为化学物质和农药的安全性评价提供了统一的、标准的、国际上认可的方法。 三、行为毒理学评价的目的与原则 1 行为毒理研究的目的 是利用行为毒理的方法研究外来化合物接触机体后的效应，并以此为指征确定其阈剂量，为制定卫生限量标准提供更为灵敏、严格的试验依据 2 行为毒理评价的原则 主要是对那些在环境中存在的可能具有神经毒性，或者可疑具有神经毒性的化学物质以及可能具有潜在神经毒性的物质，可通过各种途径与人类可能接触或进入人体的，原则上都应该进行行为毒性的评价。 四、行为毒理实验 实验动物的选择 原则上是选择生理学和动物学上的分类与人类更接近的，同时也要既容易获得，又经济的动物。 目前国际上最通用的动物是一般是初成年大鼠或小鼠；小鼠鼠龄30天以上，大鼠42天以上。20只/组，雌雄各半。 但也要注意，动物对化学物质敏感性问题，如某种杀虫剂用啮齿类动物不能检测出其神经毒性，但给小鸡投予后，经过一段时间，可以发现其神经毒性。所以，对行为毒性实验来说，化学物质的吸收、代谢和排泄等方面与特定动物神经系统易感性的选择应予足够的重视和充分的考试。 有时也可用猫、狗、猴、鸽子等。 2 剂量分组和期限 ????? 一般设三个剂量组。便于求出剂量反应关系。另设阴性和阳性对照组。 最高剂量可参考：亚慢性毒性试验的阈剂量或最大无作用剂量 3 试验期限 ????? 一般以亚慢性接触为主（90天），停止给药后应再继续观察4周或更长时间，以判断其恢复的可能性。 有时也观察急性接触引起的行为变化，求出其急性阈剂量 4 试验环境??? ? 要求所有条件（温度、湿度、光照、噪声等）适合并一致。接触受试物的时间和行为检测时间也要一致。 5 实验方法 1）一般行为检查主要包括： ①动物的外观：主要是毛发、眼睑、四肢、呼吸、尾部的位置等状态及分泌物、排泄物的颜色和量。 ②姿势和运动的观察：运动的种类、姿势、步态。例如是否有探索行为过多等不安定的状态。 ③对刺激的反应：主要是对光、声及空气吹浮的反应。 ④触摸后观察：全身状态（震颤、僵硬）、皮肤颜色、感觉过敏等。 ⑤反应和生理状况：接近反应、触摸反应、翻正反射、挟尾反应、前后肢抓力及体温、心率、呼吸等。 2）实验动物的平衡、运动和感觉行为的测定 A 翻正反射试验 适用于大、小鼠 倒提鼠尾，旋转2~3次后，使其由距离桌面20~30cm处落下，根据其落下后的姿势判断化合物破坏其平衡能力。 评分方法：反复试验5次。 侧卧出现2次以下为1级，3~4次为2级，5次为3级； 仰卧出现2次以下为4级，3~4次为5级，5次为6级；