十门联考微生物第22章螺旋体.pptx

螺旋体 spirochete 南华大学医学院 吴移谋 教授;概述;致病螺旋体的分类; 名称 螺旋数 螺旋特 举例;钩端螺旋体属（Leptospira）;（一）形态染色 螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链，一端或两端呈钩状；运动活泼，常使菌体呈C、S或8字型，G－，不易着染；Fontana镀银染色法染成棕褐色。;黄疸出血热群钩端螺旋体;钩端螺旋体镀银染色;（二）培养 ?营养要求复杂，常用Korthof培养基，适宜生长温度为28～30℃，若11～13℃能生长的为非致病双曲钩端螺旋体。最适pH7.2～7.6，小于6.5死亡，最高能耐8.4； ?需氧或微需氧； ?在人工培养基中生长缓慢。;（三）抵抗力 ?对热抵抗力弱，60℃ 1 min即死亡。0.2%来苏、1:2000升汞、1%石炭酸经10～30 min被杀灭。 ?对青霉素敏感。 ?在湿土或水中可存活数月。;（四）抗原分类 据群和型特异性抗原分血清群和血清型，问号状钩端螺旋体至少可分为25个血清群、273个血清型，其中有我国学者发现的37个血清型；我国已发现的致病性钩端螺旋体至少有19个血清群、161个血清型，是发现血清型最多的国家。;二、致病性与免疫性;（一）致病物质 1.内毒素样物质(ELS) 细胞壁中含类似脂多糖物质（LLS），引起的病理变化与典型的内毒素相似，只是毒性较低。 2.溶血素 波摩那型、犬型、七日热型产生溶血素，破坏红细胞膜而溶血。 溶血素不耐热，56℃经30分钟失活，对氧稳定，可被胰蛋白酶破坏。;（一）致病物质 3.细胞毒性因子(CTF) 注射小鼠，可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。 4.细胞致病作用（CPE）物质 引起细胞退行性病变；注射家兔，可形成红斑和水肿。;（二）所致疾病 钩端螺旋体病 人畜共患传染病，多宿主（鼠和猪为主），传播途径有： ?人与污染水或土壤接触 ?黏膜或皮肤侵入 ?消化道黏膜（污染食物/饮水） ?胎盘垂直传播 ?吸血昆虫;流行特点 季节性（夏秋）：洪水型—猪，稻田型—鼠 地区性：三多－鼠、猪、水 职业性：农民、矿工、饲养员 致病性 先形成钩体血症，损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经，出现休克、DIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等。;临床特点 起病急，高热、乏力、全身酸痛、结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大；三大症状：寒热、身痛、一身乏 三大体征：眼红、腿疼、淋巴大 免疫性 体液免疫为主，病后获得对同型钩体的持久免疫力。;三、微生物学检查法;（一）标本采集 发病10天内取血液；2周后取尿液；脑膜刺激者取脑脊液。 （二）直接镜检 （三）分离鉴定 接种至Korthof培养基，置28℃孵育阳性标本在2周内可见培养液呈轻度混浊；暗视野显微镜检查有动力，则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。;（四）动物接种 敏感方法，尤适用于有杂菌污染的标本。接种于幼龄豚鼠或金地鼠腹腔，3～5天后用暗视野显微镜检查腹腔液；或3～6天取心血检查并作分离培养。 （五）血清学诊断 病初和发病后第3～4周各采血清一次。有脑膜刺激症状者采取脑脊液。 显微镜凝集试验（microscopic agglutination test, MAT）。;显微镜凝集试验 用标准株或当地流行株作型特异性抗原，分别与病人不同稀释度血清混合，37℃孵育2 h，暗视野显微镜观察，可见钩端螺旋体凝集成小蜘蛛状。一般效价在1:300以上或晚期血清效价有4倍以上增高有诊断意义。 间接凝集试验 可溶性钩端螺旋体属特异抗原，吸附于乳胶或活性炭成为颗粒性抗原，与病人血清中相应抗体作用，可出现肉眼可见的凝集。;（六）分子生物学诊断 DNA探针杂交 用PCR扩增;防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理 接种多价钩体疫苗： 在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗。 治疗： 青霉素首选，注意赫氏反应。;第二节 密螺旋体属;（一）形态染色 8～14个致密而规则的螺旋，两端尖直。运动活泼，圆柱体表面绕有3～