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侵袭性真菌感染的实验室诊断;女,58岁,T2DM 16年。
旅游后38.1℃,轻咳,CT右肺尖0.4cm结节,生化、肿瘤标志物均正常。
住院后CT右肺尖0.8cm、0.4cm两个结节。正电子发射计算机断层显像(PET/CT)右上肺高度代谢灶,右肺门高代谢淋巴结。
抗TB治疗1月,CT示右上肺两结节融合成1.8cm×2.4cm大病灶;PET/CT右上肺、右肺门高代谢灶,恶性病变可能性大。
开胸探查,切除病灶,病理,右上肺隐球菌肺炎,多核巨细胞内隐球菌3+。
口服氟康唑。; DFI(deep fungal infection);DFI中急、危、重者。真菌在组织器官或血液中生长繁殖,导致炎症反应和组织器官损伤,常伴多器官功能障碍。;2007年欧洲癌症治疗研究组织(EORTC)侵袭性真菌感染协作组(IFICG)和美国国立变态反应与传染病研究所霉菌病研究组(NIAID-MSG)将IFI改称IFD。国内未获响应,现仅用于侵袭性念珠菌病(invasive candidosis,IC)和曲霉病(invasive aspergillosis,IA)。;真菌感染的实验诊断方法及问题;侵袭性真菌病的致病菌;念珠菌病
隐球菌病
侵袭性曲霉病; ICU患者发病率占医院获得性感染8%~15%;
器官移植受者发病率为20%~40%;
艾滋病患者IFI发病率可达90%;
美国念珠菌血症占院内血源性感染的第4位(1995~2002,49家医院);
1995年115家医院统计IFI发生率为85年1.9倍,2004年为90年代的2.4倍。
CDC统计IFI发病率(例/百万人·年)为178.3(IC72.8,隐球菌病65.5,IA22.4,球孢子菌病15.3,组织胞浆菌病7.1)。
我国医院感染监控网:1998~1999真菌感染占医院感染17.1%。; IC 10%~49%;
IA 62%~85%;
骨髓移植者IA病死率70%~90%;
接合菌致IFI病死率70%~100%。
美国Lin统计1995~2001文献1941例IA,死亡率58%(骨髓移植者86.7%,中枢N系统感染或播散性IA88.1%)。;EORTC和NIAID/MSG 2007年修订标准,国内各学会诊治指南。IFI诊断分级:
拟诊(possible)
临床诊断(probable)
确诊(proven); IFI分级诊断标准;(1)免疫功能低下:艾滋病,重度免疫缺陷,造血干细胞、器官移植长期应用免疫抑制剂,长期应用糖皮质激素。
(2)嗜中性粒细胞<0.5×109/L(<500/μl)持续10d以上。
(3)各种ICU重危患者,恶性肿瘤,尿毒症,糖尿病,慢性阻塞性肺病,大面积烧伤,慢性消耗性疾病。
(4)长期应用广谱抗生素,放疗/化疗。
(5)侵入性操作:气管插管,留置导管,腹膜透析,脑室引流,心血管手术操作。;(1)重要脏器罹患时的症状与体征
(2)相应的血、尿常规改变,生化检查指标异常
(3)各种基础病(血液病、艾滋病…..)的临床与实验室检查表现
(4)持续发热96h,经积极的抗菌治疗无效
(5)影像学检查(X线、CT等):
?肺IA: 胸膜下密度增高结节样实变——病灶周出现晕轮征——实变区液化,空洞或新月征;
?肺孢子菌肺炎: 两肺毛玻璃样间质病变;
?鼻脑毛霉病: 鼻窦、眼眶颅骨骨组织破坏。;(1)合格标本直接镜检发现菌丝且连续2次培养同种真菌阳性。
(2)BALF镜检发现菌丝,培养真菌阳性。
(3)合格标本或BALF镜检或培养发现新生隐球菌。
(4)G试验连续2次阳性。
(5)GM试验连续2次阳性。
(6)血液、胸水、BALF用LA法检测隐球菌荚膜多糖抗原阳性。;(1)血液真菌培养阳性,但曲霉、青霉(马尔尼菲青霉除外)需排除污染。
(2)导管相关性真菌血症,导管培养与血培养均阳性,且为同一真菌。
(3)胸水真菌培养阳性。
(4)肺组织真菌培养阳性。
(5)合格痰标本或BALF镜检发现肺孢子菌包囊、滋养体或囊内小体。
(6)胸水、CSF、血液直接镜检发现新生隐球菌。
(7)直接导尿培养念珠菌105CFU/ml。; 以下列念珠菌属最常见:
白色—(C.albicans)
光滑—(C.glabrata)
热带—(C.tropicalis)
近平滑—(C.parapsilosis)
克柔—(C.krusei)
都柏林—(C.dubliniensis)
季也蒙—(C.guilliermondii)。
;(1)革兰染色、乳酸酚棉蓝染色,镜检4~6μm圆或卵圆芽胞,可见出芽,假菌丝。
?用含荧光增白剂(Calcofluor White ,CFW)的10%~20% KOH涂片,紫外线激发呈蓝白或绿色荧光。
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