色谱质谱联用技术应用.pptVIP

主要内容 色谱 与 质谱 1.色谱与质谱的基本知识 2.色谱与质谱仪器 4.应用实例 3.色谱-质谱联用技术的应用 第一页，共三十九页。 1.1色谱基本知识 利用混合物中各组分物理化学性质和结构上的差异， 使其在两相中进行分离， 检测各组分的组成和含量的方法。 可对混合物进行分离、分析的仪器分析方法 具分离效能高，选择性好、灵敏度高、分析速度快 等优点，其与红外光谱、质谱等手段联用成为 混合物解析的重要手段。 第二页，共三十九页。 色谱过程 第三页，共三十九页。 纸色谱法 薄层色谱法 高效液相色谱法 液相色谱 LC 气相色谱 GC 柱层析 毛细管柱色谱法 填充柱色谱法 色谱法分类 第四页，共三十九页。 色谱法适用范围 GC：分子量低于1000，沸点低于350℃、热稳定 HPLC：只需配制成溶液 有机物 HPLC 80% GC 20% 第五页，共三十九页。 色谱定性、定量 保留时间定性 峰高/峰面积定量 第六页，共三十九页。 1.2质谱基本知识 质谱法：分子受到能量裂解后，形成带电荷的离子，这些离子按照其质量m和电荷z的比值m/z（质荷比）大小依次排列成谱被记录下来，得到质谱（MS）。 第七页，共三十九页。 质谱法是有机物鉴定（定性、定结构）四大工具中灵敏度最高，也是唯一可以直接确定分子式、相对分子质量的方法。 历史：20世纪初，Thomson发现其原理；60年代后迅速发展。 特点：应用范围广；灵敏度高，样品用量少；分析速度快；结构复杂，价格昂贵，对样品有破坏性。 第八页，共三十九页。 质谱定性、定结构 横轴表示质荷比（m/z），纵轴表示峰的强度，它以图中最强的离子峰（基峰）的峰高作为100%，而以对它的百分比来表示其他离子峰的强度。 依据带电荷碎片的质荷比以及对应的相对丰度，可判断化合物种类，并进行结构推断。 第九页，共三十九页。 流动相 进样器 色谱柱 检测器 记录仪 2.1色谱仪 第十页，共三十九页。 记录仪 检测器 色谱柱 进样器 流动相 色 谱 体 系 GC N2 填充柱-少组分 毛细管柱-多组分 TCD-通用 ECD-电负性物质 FID-碳氢化合物 FPD-含S、P物质 HPLC 水、有机溶剂、缓冲溶液 C18、C8柱 氨基柱 离子交换柱等 DAD-有紫外吸收 RID-通用 FD-荧光物质 第十一页，共三十九页。 2.2质谱仪 按质量分析器分类： 磁质谱 四级杆质谱 离子肼质谱 飞行时间质谱等 第十二页，共三十九页。 质谱体系 进样系统 离子源 质量分析器 检测器 1.气体扩散 2.直接进样 3. 色谱 1.电子轰击 2.化学电离 3.场致电离 4.激光 1.单聚焦 2.双聚焦 3.飞行时间 4.四极杆 质谱仪需要在高真空下工作：离子源（10-3 ?10 -5 Pa ） 质量分析器（10 -6 Pa ） (1) 大量氧会烧坏离子源的灯丝； (2) 用作加速离子的几千伏高压与空气摩擦会引起放电； (3) 空气会引起额外的离子－分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化。 第十三页，共三十九页。 3.色谱质谱联用技术应用 良好的分离手段 定性、定结构差 色谱 质谱 纯物质 定性、结构鉴定 优势互补 第十四页，共三十九页。 3.1色谱-质谱联用仪工作原理 1.构成 由色谱仪-接口-质谱仪组成：对于质谱而言，色谱是其进样系统；对于色谱而言，质谱是其检测器。 分析结果 计算机系统 质谱仪 接口 色谱仪 样品 色-质联用仪的构成 第十五页，共三十九页。 3.1色谱-质谱联用仪工作原理 2.工作过程 与色谱仪相同，只不过得到的色谱曲线为质谱信号随时间的变化曲线，其质谱信号为某一瞬间进入质谱检测器的所有选定离子或质量范围的离子数的总和。 第十六页，共三十九页。 （1）全扫描监测（ full scan ） 在色谱连续运行期间，对指定质量范围内的离子全部扫描并记录，得到是总离子流色谱图（TIC）。 三种农药的总离子流色谱图及其质谱图 TIC图 1 2 300000 250000 200000 150000 100000 50000 0 3 5 10 1.Oxamyl 杀线威 质谱图 质谱图 质谱图 237(M＋H)＋ 2.Methiocarb sulfoxide 甲硫威亚砜 242(M＋H)＋ 3.Methiocarb sulfone 甲硫威砜 276(M＋NH4)＋ 100000 50000 0 50000 0