血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义.pptxVIP

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血细胞分析仪原理及散点图临床应用 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 二、散点图案例分析 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究 参数,如直方图,DIFF散点图, NRBC散点图等。实验人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注的,进行涂片复检确认,提高工作效率,减少漏诊率。 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 DIFF WBC/BASO NRBC 半导体激光 荧光染色(聚次甲基+噁嗪 ) 主要原理 FSC前向散射光:细胞大小 SSC侧向散射光:复杂程度(细胞的颗粒 和细胞核等内含物的信息) SFL侧向荧光:核酸含量(DNA 、RNA) 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 DIFF通道分析原理 4DL(阴离子表面活性剂)   完全溶解RBC PLT 在WBC膜上打孔 溶血素中加入有机酸,与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附,使Eo颗粒的复杂程度增加,在 SSC显示复杂程度是最大的。 4DS 对核酸染色 纵坐标:侧向荧光(SFL) 反映核酸含量 横坐标:侧向散射光(SSC) 反映细胞内部复杂程度 化学粘附 大分子有机酸与嗜酸 粒细胞中的碱性颗粒 发生化学粘附 嗜酸粒细胞 大分子有机酸 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 RNA/DNA荧光染色原理 成熟白细胞:高荧光特性 网织红细胞:弱荧光特性 血小板: 成熟RBC: 原始细胞: 幼稚细胞: 微弱荧光特性 无荧光特性 极高荧光特性 极高荧光特性 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 荧光染色WBC分类的优势 检测异常细胞 提供幼稚粒细胞信息(IG) 提供原始细胞信息(Other) 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 10 S–FB溶血剂 (酸性,低渗) 溶解RBC PLT 除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态 Baso保持原状 纵坐标:前向散射光(FSC) 反映细胞大小 横坐标:侧向散射光(SSC) 反映细胞内部复杂程度 嗜碱 其它有 核细胞 嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液, Baso内的蛋白为酸性蛋白,因此在该 溶液中受到保护,而其他有核细胞则被 溶解成裸核 WBC/BASO 通道分析原理 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 NRBC通道分析原理 NR溶血剂 完全溶解RBC,PLT WBC保持原状 NRBC溶解为裸核 NR染液对核酸染色 纵坐标:前向散射光(FSC)  反映细胞大小 横坐标:侧向荧光(SFL)  反映核酸含量 NRBC% = NRBC# / NRBC_WBC# 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 出现有核红时 WBC的修正 红系增生活跃时,外周血易见较多的NRBC,在WBC 计数时不被溶解,常被计入淋巴细胞中。 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 WBC增多对RBC计数的干扰 RBC:阻抗法RBC值含WBC WBC100*109/L时,需校正红系统参数 贫血越严重,对RBC影响越大 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 血红蛋白通道 光电比色法 SLS(十二烷基磺酸钠):无氰无毒 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 二、散点图案例分析 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 嗜碱性粒细胞增多症 在BASO散点图上,嗜碱区 域出现大量散点,另外 DIFF散点图上,中性区域 的左下方也为嗜碱区域, 也出现了大量的散点。  BASO%:仪器13.4%  镜检13.5% 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 AML-M1(例1) 不可信 DIFF散点图显示淋巴与单核之 间融合,有分类结果,但不可 信。 IMI散点图也提示大量原始细 胞。 镜检发现有77.5%的原始细胞。 细胞表面标志CD13和CD33阳 性,CD36阴性;为急性髓细 胞性白血病。 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 AML-M2 DIFF散点图显示白细胞完全融合 且不分类。 IMI散点图显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。 NRBC散点图:红色散点 镜检发现有90%的原始细胞、3% 的早幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞。 流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志CD13和CD33阳性,为髓 细胞性白血病。 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 AML-M3 DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分 类。 IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒 细胞。 NRBC散点图:红色散点 镜检发现3%的原始细胞,91%的早幼粒 细胞、3.5%的中幼粒细胞,0.5%晚幼 粒细胞。 血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义 AML-M4 DIFF散点图,白细胞区域出现大量 灰白色散点,完全融合,不分类。 大致分成两群,一群为原始细胞, 一群为幼稚粒细胞。 IMI散点图也显示大

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