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ATP 染色实验报告
一、实验器材及试剂
1、 实验器材
名称 厂家 型号
冰冻切片机 Thermo CRYOSTARNX50
切片刀 上海徕卡仪器有限公司 LEICA 819
防脱载玻片 Wanwu G6004
正置光学显微镜 日本尼康 NIKON ECLIPSE E100
物
成像系统 日本尼康 NIKON DS-U3
万
2、 主要实验试剂
试剂名称肥厂家 货号
OCT 包埋剂 Wanwu G6059-110ML
Tris碱 Sigma V900483
氯化钙 国药集团化学试剂有限公司
合
ATP 钠盐 615B025
Solarbio
盐酸
硝酸钴 国药集团化学试剂有限公司 物
国药集团化学试剂有限公司
硫化铵 国药集团化学试剂有限公司
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 万
100092683
二、染液配制：
2%CaCl 溶液：5g 无水CaCl +250ml 超纯水
2 2 肥
2%硝酸钴溶液：5g 硝酸钴+250ml 超纯水
母液配制：Tris碱5g+氯化钙0.499g+蒸馏水定容至250ml
0.1mol/LHCL：1mlHCL+11ml 超纯水混匀后稀释 10倍
合
PH10.4孵育液：取20ml 母液，用巴氏吸管取0.1mol/L 的HCL3 滴加入，混匀，PH 约
为10.4
PH9.4 孵育液：取20ml 母液加入30mg 的ATP 钠盐，混匀，用巴氏吸管取0.1mol/L 的
HCL25滴加入，混匀，PH 约为9.4。
三、染色步骤：
1、未经固定的新鲜组织冰冻切片自然晾干，组化笔画圈圈住组织，滴加PH10.4 的孵育液孵
育5min，倾去孵育液，不水洗直接滴加PH 9.4 的孵育液孵育30min，室温下进行并加盖。
2、倾去孵育液，切片直接依次入3缸CaCL 溶液浸染，每次2min。
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