合肥万物生物瑞氏吉姆萨染色实验报告.pdf

瑞氏吉姆萨染色实验报告 一、实验器材及试剂 1、 实验器材 名称 厂家 型号 离心机 DRAGONLAB D3024R 载玻片 Wanwu G6004 正置光学显微镜 日本尼康 NIKON ECLIPSE E100 物 成像系统 日 日本尼康 NIKON DS-U3 2、 主要实验试剂 万 试剂名称 厂家 货号 二甲苯 肥国药集团化学试剂有限公司 瑞氏吉姆萨染液套装 Wanwu G1009 中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 合 二、实验步骤 物 1、涂片制备：取细胞悬液，离心，弃上清液，加适量PBS缓冲液，混匀后取适量滴于载玻 片前端，另取一块边缘光滑的载玻片做推片，将其一端置于液滴前方，向后移动至接触液滴 万 使液滴均匀分散在推片与载片的接触处。然后呈30-40°角均匀用力向另一端平稳地推出。涂 片放置自然晾干。 2、瑞士吉姆萨染色： 肥 1、血涂片染色： ①取一张血涂片，组化笔沿着载玻片的边缘尽量画一个最大的长方形；若是其它细胞涂片， 则不需要画圈。 合 ②滴加适量瑞氏染液(完全覆盖细胞即可)染色1min，用盛装纯水的洗瓶冲洗组织上的染液， 至玻片流水呈无色即可； ③胶头吸管滴加 10滴吉姆萨染色液染色30s(洗耳球轻轻吹打至染液完全覆盖细胞) 用胶头吸管直接滴加20 滴瑞氏吉姆萨C 溶液于吉姆萨染色液上染色2min(洗耳球轻轻吹打 混匀)。用盛装纯水的洗瓶冲洗组织上的染液，至玻片上流水呈无色即可； ④稍微甩下载玻片上多余的水份，显微镜快速观察：白细胞胞核分叶清晰，部 网址： 细胞网址： 地址：合肥市蜀山区长江西路248号11层 电话：400-1016-218 邮箱：2028438226@ 分白细胞胞浆着淡红色，红细胞呈红色圆饼状，无核，数量较多。立即将染好的涂片置于 65℃烤箱烘烤4h 以上 2、组织石蜡切片染色： ①石蜡切片脱蜡至水，自来水洗5min； ②取一张切片，组画笔沿着载玻片边缘画大圈圈住组织，胶头吸管滴加10滴瑞氏染液染色 2min，直接滴加0.5ml 吉姆萨：瑞氏吉姆萨D 溶液 1:19 混匀的混合液于瑞氏染液上染色 30s(洗耳球轻轻吹打混匀)； ③用盛装纯水的洗瓶冲洗组织上的染液，至玻片上流水呈无色即可；稍微甩下 载玻片上多余的水份，显微镜快速观察：肥大细胞呈紫红色，细胞核清晰呈蓝色，部分白细 胞胞浆着淡红色，红细胞呈红色圆饼状，无核。立即将染好的涂片置于65℃烤箱烘烤4h 以 上 3、透明封片：干净的二甲苯5min，中性树胶封片。 物 4、显微镜镜检，