自身免疫性溶血性贫血患者的血清学特性检测分析.docVIP

自身免疫性溶血性贫血患者的血清学特性检测分析 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：自身免疫性溶血性贫血患者的血清学特性检测分析 1 1 材料和方法 2 2 结果 3 3 讨论 5 文2：自身免疫性溶血性贫血患者的血清学特性检测分析 6 1 材料和方法 6 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 12 正文 自身免疫性溶血性贫血患者的血清学特性检测分析 文1：自身免疫性溶血性贫血患者的血清学特性检测分析 自身免疫性溶血性贫血（autoimune hemolytic anemi， AIHA）为自身抗体引起红细胞破坏的一种溶血性贫血。AIHA患者在多次输血免疫刺激后， 可产生同种免疫性抗体， 此类抗体由于患者体内同时存在的自身抗体的掩盖作用而不易被发现。研究AIHA患者自身抗体的类型及其血型同种抗体的特异性， 对确保输血安全有重要的临床意义。我们采用抗人球蛋白试验和吸收放散试验， 对54例AIHA患者自身抗体的类型及同种抗体的特异性进行了鉴定， 选择不含相应抗原及交叉配血试验相合的血液进行输注， 避免了溶血性输血反应的发生。 1 材料和方法 材料 抗A、 抗B、 抗D、 抗C、 抗c、 抗E、 抗e、 广谱抗人球蛋白血清、 抗人IgG血清、 抗人C3血清、 抗体筛选细胞（Ⅰ、 Ⅱ、 Ⅲ号）及抗体特异性鉴定谱细胞（1～10号）均购自上海市血液中心; 凝聚胺试剂盒购自台湾贝索公司; 微柱凝胶卡及其配套设备购自瑞士达亚美公司; 磷酸氯奎、 乙醚（分析纯）系西安化学试剂厂生产; ABO血型反定型试剂红细胞系3名献血员的血液洗涤后混合而成， 由第四军医大学唐都医院输血科制备。在第四军医大学唐都医院就诊的AIHA患者54例(男20例， 女34例， 年龄10～58岁)， 均经抗人球蛋白试验及结合临床表现确诊。 方法 抗人球蛋白试验 抽取患者静脉血6 mL（ACD保存液抗凝）， 2 000 min离心10 min， 分离血清与红细胞， 红细胞用生理盐水洗涤3次， 配成30 mL/L的红细胞悬液备用。（1）直接抗人球蛋白试验（Direct antiglobulin test， DAT）: 取30 mL/L的红细胞悬液1滴加入试管中， 再加入抗人球蛋白血清1滴， 摇匀3 000 min离心15 s观察结果， 若为阳性， 再用抗IgG和抗C3抗体进行分型; （2）间接抗人球蛋白试验（Indirect antiglobulin test， IAT）: 取患者血清（或血浆）2滴加入试管中， 再加入30 mL/L O型RhD阳性红细胞悬液1滴， 摇匀放37℃水浴30 min， 用生理盐水洗涤3次， 加入抗人球蛋白血清1滴， 3 000 min离心15 s观察结果， 阴、 阳性对照参照文献［1］ 同种抗体检测 （1）氯奎放散试验: 将AIHA患者DAT为阳性的红细胞， 用生理盐水洗涤3次， 取压积红细胞 mL， 加入200 mL/L氯奎生理盐水溶液 mL， 在37℃水浴震摇5 min， 再用生理盐水洗涤3次， 取1滴配成50 mL/L 的悬液作DAT， 乙醚放散试验参照文献［2］。（2）自身温抗体吸收试验: 将IAT阳性患者的红细胞用37℃生理盐水洗涤3次， 取1 mL压积红细胞， 加10 mL/L菠萝酶1 mL， 混匀1 000 min离心洗涤3次， 将压积红细胞分成2等份， 1份压积红细胞加2 mL患者血清， 混合放37℃水浴30 min， 1 000 min 离心2 min， 将血清移到第2份压积红细胞中， 混匀放37℃水浴30 min， 1 000 min离心2 min， 吸出自身红细胞吸收后的血清， 用IAT进行同种抗体的检测与特异性鉴定。 ABO、 RhD血型鉴定与交叉配血试验 对血型鉴定困难及交叉配血试验不合的患者血液标本， 采用经吸收放散后的血清及红细胞进行血型鉴定与交叉配血试验。ABO血型鉴定采用盐水法进行正反定型; 疑难ABO、 Rh血型鉴定及交叉配血试验采用微柱凝胶法（microtubes gel technology， MGT）及手工凝聚胺法（manual polybrene test， MPT）进行检测［3］ 2 结果 抗人球蛋白试验 54例AIHA患者的DAT和IAT均显示阳性反应， 凝集强度DAT ～， IAT ～。将患者红细胞检测结果（即DAT阳性）分为3组: (1)广谱抗人球蛋白组; (2)抗IgG组; (3)抗C3组。(1)、 (2)组抗人球蛋白试验阳性为IgG型; (1)、 (3)组阳性为C3型; (1)、