三越麻黄汤有效部分的确定及其理化性质研究.doc

三越麻黄汤有效部分的确定及其理化性质研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：三越麻黄汤有效部分的确定及其理化性质研究 2 1 仪器与材料 2 2 方法与结果 2 3 讨论 5 文2：蛋白质的理化性质 7 一、蛋白质的胶体性质 7 二、蛋白质的两性电离和等电点 8 三、蛋白质的变性 9 四、蛋白质的沉淀 10 (一)盐析(Salting Out) 10 (二)重金属盐沉淀蛋白质 11 (三)生物碱试剂以及某些酸类沉淀蛋白质 11 (四)有机溶剂沉淀蛋白质 11 (五)加热凝固 11 五、蛋白质的呈色反应 12 (一)茚三酮反应(Ninhydrin Reaction) 12 (二)双缩脲反应(Biuret Reaction) 12 (三)米伦反应(Millon Reaction) 12 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 14 正文 三越麻黄汤有效部分的确定及其理化性质研究 文1：三越麻黄汤有效部分的确定及其理化性质研究 三越麻黄汤源自古方及临床实践的结合(由麻黄、石膏、苦杏仁、板蓝根、甘草、陈皮、柴胡、射干、鱼腥草、浙贝母等组成)，主用于治疗外感风寒引起的感冒及急性支气管炎、支气管肺炎、支气管哮喘症等。我们在优选出其最优提取工艺后[1]，根据有效部分的概念采用极性梯度分离的方法并结合主要药效学指标初步确定了其有效部分，并对其理化性质进行了初步研究，以期为该复方的深入研究奠定实验基础，同时为中药复方有效部分的研究提供借鉴。 1 仪器与材料 仪器721可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)，电子分析天平(BS110S，北京赛多利斯有限公司，d:)，BT—1000粉体综合特性测试仪(丹东百特仪器有限公司) 试药麻黄、甘草、射干、陈皮、柴胡、鱼腥草、石膏、浙贝母、苦杏仁、板蓝根(均符合《中国药典》2005版要求)。氯仿、醋酸乙酯、正丁醇、伊文思蓝、酚红均为分析纯，乙醇为工业级。 动物昆明种小鼠，清洁级，购自新疆医科大学动物实验中心，合格证号：新医动字(96)16001号。 2 方法与结果 标准提取液的制备按处方比例称取10 kg药材(最粗粉)，将柴胡、浙贝母、甘草、陈皮、鱼腥草、射干6味药材，以80%乙醇为溶媒，回流提取3次，所加溶媒量为药材量的8倍，回流提取时间为 h/次，合并乙醇提取液，减压(-～-、温度60～70℃)回收乙醇至无醇味，另器存放。以水为溶媒，将醇提药渣与剩余4味药材(麻黄、生石膏、苦杏仁、板蓝根)进行合煎，共煎煮2次， h/次，每次加水量为药材量的16倍，合并水提液，减压浓缩(-～ - MPa、温度90℃)，将此浓缩液与回收乙醇后的浓缩液合并，继续浓缩，并减压干燥(- ～ - MPa、温度60～70℃)至干浸膏，得干浸膏约 kg。 不同极性部分的分离[2～4]取干浸膏1 540 g(约相当于药材6 623 g)分次用索氏提取器进行回流提取。具体操作方法为：首先用醋酸乙酯进行提取，当提取液无色时即认为提取完全，则将提取剩余浸膏干燥至无醋酸乙酯味，然后用氯仿进行回流提取至提取液无色，将剩余浸膏干燥至无氯仿味，然后装入渗漉筒内，以正丁醇为渗漉溶媒进行渗漉至渗漉液无色。分别将醋酸乙酯提取液、氯仿提取液、正丁醇渗漉液减压回收有机溶剂，并分别减压浓缩至稠浸膏，将稠浸膏分别进行减压冷冻干燥至干浸膏，密闭保存，分别记为醋酸乙酯部分、氯仿部分、正丁醇部分。将正丁醇渗漉后剩余浸膏干燥至无正丁醇味，因该部分既具有水溶性的高极性成分，又具有水中所不溶的化合物，故记为水溶及水不溶物部分。结果见表1。表1 极性部分的分离结果 有效部分的筛选 样品的制备分别取适量各不同极性分位样品置于研钵中，加少量乙醇润湿后加%羧甲基纤维素钠溶液，边加边研磨至溶液为均匀混悬液，分别得醋酸乙酯部分样品、氯仿部分样品、正丁醇部分样品、水溶及不溶物部分样品。 有效部分的筛选 各极性部分对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[2，5，6]：取昆明种小鼠60只，雌雄各半，体质量(±)g，随机分为生理盐水组、标准汤剂组、醋酸乙酯组、氯仿组、正丁醇组、水溶及不溶物组，ig给药，1次/d，连续3 d，于末次给药后 h尾静脉注入%的伊文思蓝生理盐水溶液 ml/10 g并立即%的乙酸/只，20 min后处死小鼠，剪开腹部，用6 ml 生理盐水分次洗涤腹腔，吸出冲洗液，合并后以生理盐水稀释至10 ml，3 000 min离心15 min，取上清液于590 nm处测吸收度值，并以抑制率(%)=[(对照组吸光度—实验组吸光度)/ 对照组吸光度×100%]计算抑制率，采用统计程序对表中数据进行统计学