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关于Leptin对小鼠窗口期子宫内膜上皮细胞MMP9及ICAM1的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：关于Leptin对小鼠窗口期子宫内膜上皮细胞MMP9及ICAM1的影响 1 1 材料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 5 文2：关于Leptin对Leptin受体在GH3细胞中表达的影响 6 0　引言 7 1　材料和方法 8 2　结果 10 3　讨论 11 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 14 正文 关于Leptin对小鼠窗口期子宫内膜上皮细胞MMP9及ICAM1的影响 文1：关于Leptin对小鼠窗口期子宫内膜上皮细胞MMP9及ICAM1的影响 [Abstract] Objective To investigate the effect of Leptin on matrix metalloproteinases-9(MMP-9) and intercellular adhesion molecule-1(ICAM-1)secreted from endometrial epithelial cells during embryo implantation widow stage in Endometrial epithelial cells from mice in the embryo implantation stage were fertilized in vitro. The endometrial epithelial cells were treated with Leptin. The immunohistochemical method was applied to test the expression of MMP-9， ICAM-1 in the endometrial epithelial With the increase in the concentration of Leptin， both the amount of MMP-9 secreted from the endometrial epithelial cells fertilized in vitro and the amount of ICAM-1 secreted from the endometrial epithelial cells fertilized in vitro increased in a dose-dependent manner(P [Key words] Leptin; endometrial epithelial cells; immunohistochemical method;MMP-9; ICAM-1; mice 近年的研究表明，多种细胞因子和激素在胚胎生长发育及妊娠母体中起着不可低估的调控作用。其中，瘦素(Leptin)是近年发现的Ⅰ型细胞因子，是肥胖基因的产物，由白色脂肪细胞分泌的一种含146个氨基酸的蛋白质。Margetic等[1]报道Leptin通过调节下丘脑-垂体-性腺的功能影响性激素的合成和分泌，也可通过直接或间接的外周作用对生殖系统功能产生影响，抑或通过直接结合卵泡细胞膜表面瘦素受体影响细胞的功能，但其具体机制尚不明了。本研究拟通过免疫组化方法检测围着床期小鼠子宫内膜上皮细胞在不同浓度Leptin作用下MMP-9、ICAM-1的表达量，以探讨Leptin在胚胎着床过程中的可能调控作用。 1 材料与方法 材料 实验动物 成年昆明种雌性小白鼠，6～8周龄，体重25～30g。雄性3～4月龄，体重40～50g。由烟台绿叶生物制药公司实验动物中心提供[许可证号：SCXK(鲁)]。实验动物房光、暗周期均为12h，饲养温度为 24℃～26℃，喂普通小鼠饲料，自由摄食饮水。 试剂 DMEM/F12培养基 (Hyclone，美国);胎牛血清(FBS)( Gibco，美国 );双抗(Hyclone，美国);孕马血清促性腺激素(PMSG)(宁波第二激素厂);人绒毛膜促性腺激素(HCG) (烟台北方制药厂) ;鼠重组瘦素(Leptin)(Sigma，美国);MMP-9、ICAM-1兔抗鼠单克隆抗体(武汉博士德);SP免疫组化试剂盒(北京中杉金桥);DAB 试剂盒(Invitrogen，美国) 方法 小鼠子宫内膜细胞的原代培养与鉴定 取成年雌性昆明种小白鼠，体重25～30g，4～5pm腹腔注射PMSG 10IU，48h后腹腔再注射HCG 10IU。雌雄按 2:1合笼 ，自然交配 ，次晨查见阴栓者定为妊娠第一天。取妊娠第四天雌鼠脱颈处死，按照石运芝[