研究观察肥大细胞在口腔黏膜良性淋巴组织增生病中的表达和临床病理表现.docVIP

研究观察肥大细胞在口腔黏膜良性淋巴组织增生病中的表达和临床病理表现 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：研究观察肥大细胞在口腔黏膜良性淋巴组织增生病中的表达和临床病理表现 1 1、资料与方法 2 2、结果 3 3、讨论 5 文2：CA125CA199在良性肝病中临床意义研究 7 1 对象与方法 8 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 研究观察肥大细胞在口腔黏膜良性淋巴组织增生病中的表达和临床病理表现 文1：研究观察肥大细胞在口腔黏膜良性淋巴组织增生病中的表达和临床病理表现 口腔黏膜良性淋巴组织增生病(BLOM)是一种临床上并不少的口腔黏膜病。课题组前期调查[1]发现%BLOM表现为黏膜糜烂溃疡、%为白纹或白斑、%为结节状突起、临床误诊率高达98%。由于误诊率高，多年来人们忽视了BLOM[2]，其发病机制更是少有研究。肥大细胞(MC)[3]是一种重要的免疫细胞，它参与了机体多种生理和病理过程如过敏反应、慢性炎症、肿瘤等。研究证实MC在口腔扁平苔藓[4]、白斑[5]、口腔黏膜下纤维性变等组织中[6]都发现有数目的增多，提示MC在口腔黏膜病的发生中发挥了重要作用。BLOM与MC关系的研究至今少有报道。本研究采用甲苯胺蓝组织化学染色和类胰蛋白酶抗体免疫组织化染色观察BLOM中MC分布、数量及脱颗粒情况，探讨MC在BLOM中表达及其与临床病理的关系。 1、资料与方法 研究对象 30例BLOM蜡块均来自河北医科大学口腔医院病理科作为BLOM组。15例正常黏膜组织取自肿瘤周围正常黏膜作为正常对照组。30例BLOM患者均无移植宿主疾病、丙型肝炎或艾滋病毒感染;活检前近6个月均没有接受过局部或全身治疗。 30例BLOM中，男性10例(%)，平均年龄(±)岁，女性20例(%)，平均年龄(±)岁。病程～240个月不等，平均病程(±)个月，中位病程12个月。15例正常黏膜组织取自肿瘤周围正常黏膜作为正常对照组。其中男性7例(%)，平均年龄(±)岁、女性8例(%)，平均年龄(±)岁。 试剂 甲苯胺蓝染色试剂盒(北京雷根生物技术有限公司);肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体(Abcam公司，英国);PV-9000免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒(北京中杉金桥) 实验方法 将组织蜡块分别切成厚度为3～4μm的切片，常规脱蜡至水，入甲苯胺蓝液中染色20min，95%酒精分色，镜下控制，无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。 将组织蜡块分别切成厚度为3～4μm的切片，脱蜡至水，/LPBS冲洗5min×3次，放入枸橼酸缓冲液中热修复，一抗类胰蛋白酶抗体滴度为1∶1000，以后按PV9000试剂盒说明书操作，苏木素复染，无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。阳性对照采用已知的阳性组织切片，空白对照用PBS代替一抗。 甲苯胺蓝染色中MC计数标准参照潘倩如[7]的方法，分别将BLOM组和正常对照组每张切片在高倍视野(×400)下选取MC数目最多的5个视野进行计数，计算5个视野MC总数和脱颗粒率平均值。脱颗粒率=(脱颗粒MC数/MC总数)×100%。MC判定:甲苯胺蓝染色细胞核为蓝色，胞核不明显，胞浆紫红色，细胞周围无紫红色颗粒溢出者为MC;免疫组织化学染色类胰蛋白酶阳性信号为胞浆出现棕黄色颗粒。甲苯胺蓝染色脱颗粒MC判定:细胞核清晰或破裂、胞浆颗粒清晰，周围组织中存在紫红色颗粒者为脱颗粒MC。 统计学处理 采用对数据进行统计学分析。计量资料采用xˉ±s表示，2组间比较采用独立样本t检验、多组间比较采用单因素方差分析，P有统计学意义。各组方差齐性时，多个样本均数间的两两比较采用Bonferroni法检验，调整检验水准为，P有统计学意义;若方差不齐时采用TamhanesT2法。 2、结果 甲苯胺蓝染色结果 ①甲苯胺蓝染色MC总数在BLOM组(图1)和正常对照组的表达(图1，表1):MC总数在BLOM组明显增多，弥漫分布于黏膜固有层淋巴细胞之间、淋巴滤泡周围或血管周围;其形态为圆形或椭圆形，细胞核蓝色居中或偏位，胞浆紫红色或含有大小不一的紫红色颗粒。正常对照组MC总数较少，分布于黏膜上皮下，但其体积较BLOM各组明显缩小。BLOM组MC数目较正常对照组升高(P);②BLOM组和正常对照组甲苯胺蓝染色MC脱颗粒率(表2)BLOM组甲苯胺蓝染色MC均发生了不同程度地脱颗粒:MC破碎，核膜不清晰，周围可见大量紫红色颗粒(图2，箭头示)。BLOM组MC脱颗粒率较正常对照组明显升高(P) 免疫组化染色结果(表3) 类胰蛋白酶抗体免疫组织化学染色MC总数在BLOM组和正常对照组均有明显表达(图3)，但BLOM