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探究根际微生物群落结构对SD污染的响应 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：探究根际微生物群落结构对SD污染的响应 1 1、材料与方法 2 2、结果与讨论 5 3、讨论 8 4、结论 9 文2：森林采伐对群落结构的影响 9 2采伐对更新的影响 10 3采伐对群落演替的影响 11 4采伐干扰对生物多样性的影响 11 5采伐对其他方面的影响 12 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 14 正文 探究根际微生物群落结构对SD污染的响应 文1：探究根际微生物群落结构对SD污染的响应 磺胺类药物是一类具有对氨基苯磺酰胺结构的磺胺类广谱抗菌药物，磺胺嘧啶(SD)作为具有对氨基苯磺酰胺结构的磺胺类广谱抗菌药物的典型代表，其在我国的生产量和使用量都很大.据统计，2013年我国磺胺类药物使用量达7920t，其中兽药消耗比例占76%[1].且利用率低，约50%～90%以原药或代谢物的形式随动物粪尿排出体外，进入生态环境，对微生物和动植物产生不利影响，并最终影响人类健康[2，3，4，5].Elena等[6]调查了畜禽废物中磺胺类、甲氧苄氨嘧啶和四环素类的残留情况，其中磺胺类药物浓度达到20～91mg/kg.有研究调查了广州、深圳等地菜地土壤的磺胺类药物残留量，土壤样品均检出2种以上磺胺类抗生素，平均含量在～μg/kg[7].环境中残留的抗生素，会诱导敏感菌抗性基因的增强[8]，从而干扰整个生态环境.已有研究证实，磺胺类药物对人体健康有较大危害[9，10，11].且由于磺胺类药物在动物性食品中易残留，因此，我国规定食品和饲料中磺胺类药物残留总量不得超过/kg，奶中磺胺二甲嘧啶不得超过/kg[10] 磷脂脂肪酸是生物细胞组分中构成生物膜的重要物质，种类稳定，数量丰富，作为一种细胞表面物质，与种族特异性细胞免疫和细胞识别等有密切关系[12].Garwood等[15]发现玉米株高和穗长与PLFA有相关性.同时植物具有的抗旱、抗寒等特性也与PLFA密切相关[13，14].研究表明，PLFA还与微生物的遗传变异、种类进化、生物毒素及耐药性等有关[16，17]，因此，特征PLFA可作为反映微生物生物量和群落结构变化的重要生物标记物.根际是植物生长过程中，在根系分泌物、酶等多种因素作用下，形成的特殊微域环境，根际微生物群落结构不同于土体，在污染物作用下，微生物群落结构发生变化.根际是污染物环境效应研究的热点，但有关磺胺类兽药对根际微生物群落结构，组成和数量等的影响研究较少.本文以黄潮土为研究对象，研究在磺胺嘧啶(SD)胁迫下，不同生长期玉米和小麦驯化根际土壤PLFA的变化，揭示根际微生物群落结构对SD污染的响应，分析不同作物根际微生物与SD降解的内在联系，为探索磺胺类兽药污染土壤的微生物修复提供科学依据。 1、材料与方法 实验材料 土壤采自河南师范大学生物园，洁净土壤，理化性质如下:;阳离子交换量/kg;全磷含量/kg;全钾含量/kg;有机质%;黏粒%;粉粒%;黄潮土.小麦(TriticumaestivumL)泛麦5号，发芽率为98%;玉米(ZeamaysL)，豫单606，发芽率96%，购自新乡市种子公司。 SD标准品(白色结晶，纯度为%，美国Sigma公司);甲醇(色谱纯，美国Fisher公司);三氯甲烷(色谱纯，洛阳昊华化学试剂有限公司);正己烷(色谱纯，上海晶纯试剂有限公司);重蒸水(二次蒸馏水) 测定方法 表1表征微生物的特征PLFA 注:(1)i、a、cy和Me分别表示异、反异、环丙基和甲基分枝脂肪酸;ω、c和t分别表示脂肪端、顺式空间构造和反式空间构造。 采用高效液相色谱(HPLC，Wate高效液相色谱仪)测定操作条件如下:SunFireC18分析柱(150×，5μm)，保护柱(C18，×20mm，5μm);Wate2998二极管阵列检测器(Wate，Singapore);Wate1525Binary溶剂输送泵(Wate，Singapore);流动相:甲醇-1%乙酸(体积比为30:70);检测波长:270nm;进样量20μL;流速:1mL/min;柱温:35℃。 PLFA检测采用气相色谱-质谱联用仪(Agilent5973Netwark)测定，色谱条件如下:50℃起始，10℃/min升至270℃，保留17min.汽化室温度290℃，载气为He(/min)，柱前压(1psi=)，进样量μL，进样分流比2:1.结果定性采用计算机自动检索质谱图库的方法;定量采用总离子流各峰面积归一化，各脂肪酸甲酯含量用脂肪酸峰面积/内标物(19:0)峰面积的比值确定。 本研究通过PLFAs谱图中不同种类PLFAs含量分析土