065 防己中粉防己甲素和乙素的提取分离与鉴定.pdf

防己中粉防己甲素和乙素的提取分离与鉴定 [适用对象] 环境科学、药学、药物制剂专业 [实验学时] 24学时 一、实验目的 学习生物碱类成分的一般提取分离法，通过实验要求： （1）掌握生物碱的溶剂提取法和粉防己碱与防己诺林碱的分离方 法。 （2）熟悉生物碱的一般理化性质。 （3）熟悉粉防己碱和防己诺林碱的检识方法。 （4）掌握回流法、萃取法、结晶法等的基本操作过程及注意事项。 二、实验原理 本实验是根据粉防已碱和防已诺林碱游离时难溶于水，易溶于 氯仿，成盐后易溶于水，难溶于氯仿的性质提取得到总生物碱。再利 用两者在冷苯中的溶解度不同，使之相互分离。 三、仪器设备 （单口，双口）园底烧瓶，冷凝管，铁架台，分液漏斗，三角烧 瓶，滤纸，微量抽滤器，布氏漏斗，层析槽，毛细管等。 四、相关知识点 防已为防已科植物粉防已Stephania tetrandraS.Moore的干燥根。 总生物碱含量约为1.5~2.3%，主要为粉防已碱和防已诺林碱。 1、粉防已碱（tetrandrine），又称汉防已甲素，分子式C H N 38 42 2 O ，在防已中的含量约为1%，为无色针状结晶（乙醚），mp.217~218℃。6 易溶于甲醇、乙醇、丙酮、氯仿，溶于乙醚、苯等有机溶剂，几乎不 溶于水和石油醚。 OMe MeO H C N N CH 3 OR 3 O O OMe 粉 防已 碱 R=CH3 防已 诺 林 碱 R=H 2、防已诺林碱（fangchinoline ），又称汉防已乙素，分子式C37 H40 N O ，在防已中的含量约为 0.5% ，六面体粒状结晶（丙酮） ， 2 6 mp.237~238 ℃。溶解度与粉防已碱相似，但因较粉防已碱多一个酚羟 基，故极性较粉防已碱稍大，因此在冷苯中的溶解度小于粉防已碱， 可利用此性质相互分离。 五、实验步骤 （一）总生物碱的提取 称取粉防已粗粉150克，置1000 ml 圆底烧瓶中，加 95% 乙醇 以浸透并盖没生药为度（约需400 ml ）。水浴加热回流1 小时（加热 期间振摇数次），滤出提取液，药渣再加95% 乙醇以浸没为度（约需 300 ml ），如上法再热提一次，滤出提取液，最后将瓶内药渣倒在布 氏漏斗上抽滤压干，药渣弃去。合并两次乙醇提取液，放冷后如有絮 状物析出，再抽滤一次，澄清液回收乙醇，浓缩至糖浆状无乙醇味为 止，得乙醇总提取物。 （二）生物碱的分离 1、亲脂性生物碱和亲水性生物碱的分离 糖浆状总提取物移至大三角烧瓶中，逐渐加入1 %盐酸稀释，充 分搅拌使生物碱溶解，不溶物呈树脂状析出，直至加酸水溶液不再发 生混浊为止（约需300 ml ），静置，倾出上清液，瓶底的树脂状杂质 以1 %盐酸少量分次洗涤，直至洗液对生物碱沉淀试剂反应微弱时为 止。 合并洗液和滤液，静置片刻，抽滤得澄清滤液，置 1000 ml 三 角烧瓶中，滴加浓氨水至PH 9 左右，此时亲脂性叔胺碱游离析出（如 有发热现象，设法冷却），待溶液冷后，移至1000ml 的分液漏斗中， 加氯仿 150 ml 振摇萃取。分取氯仿层，氨碱性水溶液再以新鲜氯仿 萃取数次，每次用氯仿 100 ml，直至氯仿抽提液的生物碱反应微弱 时止（检查时取少量氯仿抽提液置表面皿上，待溶剂挥干，残留物中 加稀盐酸数滴使溶解，再加生物碱沉淀试剂试之），合并氯仿液。 此氯仿液中含亲脂性叔胺碱，氯仿萃取过的氨碱性水溶液含亲 水性季铵碱。后者取出少量，加盐