农药残留快速检测技术及应用.ppt

① 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右 见方碎片，取2g放入烧杯或提取瓶中，加入10mL缓冲溶液浸没菜叶， 提取3min后，将提取液转入试管,待测。 ② 测定： 对照溶液测试： 于比色皿中加入2.5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、 0.1mL 显色剂，10分钟之后，加0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，于412nm波长下检测，仪器自动记录反应3min的吸光度变化值A0。 样品测试： 于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，仪器自动显示以抑制率表示的检测结果。 15 直观结果 酶抑制率法实验流程 判断标准：抑制率＜50%为合格样品 抑制率≥50%为超标样品 六、检测中注意事项及异常情况分析 注意事项 检测的品种要求：葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄中含有影响酶的次生物质，容易产生假阳性，处理这类产品应采用整株浸提的方法。 含泥土比较多的样品，应先擦去泥土，切忌缓冲液浸泡前用水冲洗，浸泡后用滤纸过滤后再进行检测。 检测的环境要求：应避免在有其它异味，或刚喷洒有杀虫剂等的环境下检测； 试剂保存条件要求：0-4℃保存，试剂配置好，应在一周内用完。卡片开封，应该在两天内用完。 20 检测中异常情况分析： 从仪器分析：检查仪器电源是否正常连接，开机后自检是否正常，走板是否卡板，空板是不是数据正常。 从试剂分析：看试剂保存条件对不对，是否过期，试剂形态是否正常，做出来的空白吸光度数据是不是在要求范围内。 从人员操作分析：上两项都正常，我们人员的操作就尤为重要了。主要从样品的前处理：提取是否有效？检测液的滴加是否规范？等这几方面着手分析考虑。尤其是人员操作的熟练程度，我们从国标GB/T5009.199-2003着手分析。 感谢您的关注 竭力为您服务 蔬菜、水果中农药残留 快速检测技术及应用 主要内容 农药残留快速检测的标准 目前常用农残检测方法 目前常用的农药残留快速检测仪分类 卡片法原理以及检测步骤 酶抑制率法原理以及检测流程 检测中注意事项及异常情况分析 一、农药残留快速检测标准 （1）国家标准：GB/T5009-2003《蔬菜中有机磷和 氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》 （2）行业标准：NY/T488-2001《蔬菜中的有机磷和 氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法》 二、目前常用农残检测方法 （1）速测卡法：用对农药高度敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的酶试纸。 （2）酶抑制率法（分光光度法）：在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。 （3）酶联免疫法：是把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一种检测技术。 （4）色谱法：利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。 农药残留检测方法比较及优缺点 农药残留检测方法比较及优缺点 检测方法 应用范围 方法精度 检测速度 操作难易 速测卡法 快速筛查 低 快 易 酶抑制率法 快速筛查并有总量抑制数据 中 较快 较易 酶联免疫法 已知单一品种农药的定量 较高 中 中 色谱法 对农药残留准确的定性定量 高 慢 难 快速检测方法的优缺点 缺点： 无法对是哪种农药进行准确定性 无法定量或定量准确性不高 能够检测的农药种类范围窄 有假阳性等结果 优点： 检验分析周期短 检测费用低 无须消耗有机溶剂，无环境污染 无须使用色谱仪等昂贵仪器设备 对检测人员的化学分析能力要求不高 检测过程简便，易于掌握 7 对象： （1）有机磷类农药：如甲拌磷、内吸磷、对硫磷、敌百虫、乐果、马拉松、甲基对硫磷基、二甲硫吸磷、敌敌畏、氧化乐果、久效磷等。 （2）氨基甲酸酯类农药：如混灭威、异丙威、克百威、速灭威、涕灭威、仲丁威、灭多威、甲萘威、抗蚜威等。 以上两类农药的有毒代谢产物 农药残留快速检测对象 8 检测方法 标准编号 适用范围 卡片法 GB/T5009.199-2003 蔬菜、水果 酶抑制率法 NY/T448-2001 蔬菜、水果 GB/T5009.199-2003 蔬菜、水果 依据： 三、目前常用的农药残留快速检测仪分类 1、卡片法：普通卡片机和智能型卡片机 2、分光光度法：比色皿型和微孔板型 11 卡片法所用检测仪器