《植物组织培养》期末复习总结及试题.docx

组培类型：愈伤组织群：培养基上由培养物脱分化产生的无序薄壁c团。①离体植物器官组织c（脱分化）→愈伤组织（再分化）→根芽→植物体②再分化方式（器官发生型:由愈伤组织不同部位产生不定芽或不定根,通常单极性；胚胎发生：由愈伤组织产生胚状体，双极性③培养条件:全部营养成分的培养基,温度、空气、无菌环境,适宜PH、光照④体c胚有生殖隔离特点,必须拿下来继续培养器官发生垂直接长成。悬浮c培养：目的是生产有用产物，不断搅拌或摇动的液体培养基中培养单c或小c用的培养方法。器官培养：用于菌木快繁，对植物的根茎叶花器等各器官离体培养。茎尖分生组织培养：目的、脱毒培养。原生质体培养：体细胞杂交。 组培发展阶段：萌芽1902年德国G..berntlt提出单细胞有潜在全能性。奠基1934年美国P.R.white用无机盐，酵母提取液和蔗糖组成的培养基,进行番茄根离体培养,建立第一个活跃生长并能继代增殖的无性繁殖系，从而使胚器官的培养首次成功。蓬勃发展48年美国F.Skoog和中国崔徵认识到腺嘌呤和生长素比控制芽形成重要因素。 组培应用：遗传突变体筛选；有用化合物工业化生产；花药培养技术缩短杂合体纯合时间，加速育种进程；离体茎尖培养技术脱毒，解决无性繁殖品种退化；离体授粉方式使生物融合技术发展。 设备玻璃器皿培养器皿（试管、三角瓶、培养皿、果酱瓶）；分注器（注射器式、漏斗式、量筒式）；其他（烧杯、量筒、移液管、移液枪、容量瓶、试剂瓶）器械：镊子、解剖刀、剪刀、接种针、细菌过滤器；仪器设备:a无菌操作:超净工作台；高压蒸汽无菌锅；烘箱b培养空调;加湿器和去湿机;定时器;培养架;摇床和旋转床;恒湿恒温光照培养箱c药品储藏配置仪器：冰箱;天平;酸度计d观察分析仪器：体视显微镜;普通光学显微镜;电子显微镜e其他离心机;蒸馏水制备装置 培养基分类：诱导培养基:外植体诱导发生愈伤组织的培养基（脱分化培养基）。继代培养基:诱导出愈伤后,使愈伤不断生长的培养基。分化培养基:由愈伤组织诱导成小苗、幼芽或胚状体的培养基。生根培养基:诱导再生苗生根的培养基 六、突变体的原理及选择方法 1、原理：（生物有机体的合成代谢，是受末端产物的反馈抑制调控，保持正常的产物代谢平衡）如果产生突变体，代谢产物对这种反馈调控不敏感，那么，突变体内末端产物的含量就可以比突变的正常体高许多倍。化学诱变具有定向突变特点：在培养基中加入脯氨酸或羟脯氨酸筛选高脯氨酸密度。 2、方法：直接法：正选法：把细胞培养在一种亲本细胞不能生长的培养基上，或亲本细胞死亡的培养基上，即施加选择压（在离体培养条件下，用于诱导培养物产生突变的因素，如物理或化学因素）经诱变或未经诱变的培养组织可用增加选择抑制突变细胞生长的化学物质的方法进行选择，在培养集中加入不同的选择压可以对所需性状定向选择。负选法:使用特定培养基，是突变细胞受到抑制处于休眠状态，而非突变细胞正常生长；然后，使用一对突变细胞无害而对正常细胞有害的药物，淘汰非突变细胞，最后用正常培养基恢复突变细胞生长。营养缺陷型突变：对某些必须的营养物质（如氨基酸）或生长因子的合成能力出现缺陷的变异菌株或细胞。必须在基本培养基（如由葡萄糖和无机盐组成的培养基）中补加相应的营养成分才能正常生长。间接法：根据性状之间的相关关系，通过对一个性状（即辅助性状）的选择来达到改良另一个性状（即目标性状）的目的选择方法。当缺乏直接选择表型指标或不能用直接选择法分离的突变体，可用间接法。可以通过加脯氨酸及类似物诱导细胞产生抗旱突变体，因为抗羟脯氨酸类似物突变体可过量合成脯氨酸，是植物提高抗旱性的适应反应。 半连续培养：利用培养罐进行大量细胞培养的一种方式。 无性系变异：由任何形式的细胞培养所产生的植株所表现出来的差异。 2．胚状体：在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。 1. 看护培养：用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织培养细胞的一种方法。 2. 无融合生殖：由配囊中卵细胞以外的其他细胞发育成的单倍体植株。 4. 悬浮培养：将游离的植物单细胞或小细胞团，按一定的细胞密度在受到不断拉动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。 6. 选择压：在2个相对性状之间，一个性状被选择而生存下来的优势。 4．条件培养基：在培养集中加入高密度的细胞进行培养，经过一段时间后，这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质，使培养基条件化，使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。 6. 同步化培养：培养基中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段。 1．愈伤组织:指在培养基上由培养物产生的无序生长且没有一定结构的薄壁细胞团。 5．植板率：每个平板上形成的细胞团数/每个平板上接种的细胞总数*100%、 18．继代培养：对来自于外植