免疫组化结果判断及常见问题的分析演示文稿.pptVIP

内源性生物素—淋巴结转移性甲状腺腺癌 第三十页，共四十六页。 蜕膜组织部分胞核PR阳性，血管内红细胞过氧化物酶显色 第三十一页，共四十六页。 嗜酸性粒细胞中细胞色素显色 第三十二页，共四十六页。 吞噬细胞内 含铁血黄素 第三十三页，共四十六页。 坏死组织着色：AE1/AE3 第三十四页，共四十六页。 坏死组织着色 第三十五页，共四十六页。 交叉反应：乳腺ki-67组织细胞胞浆着色 第三十六页，共四十六页。 免疫组化结果判断及常见问题的分析演示文稿 第一页，共四十六页。 免疫组化结果判断及常见问题的分析 第二页，共四十六页。 第三页，共四十六页。 肝脏：CK8理想着色，胆管上皮细胞强阳性， 肝细胞呈不同层次阳性。 第四页，共四十六页。 pan CK（AE1/AE3） 在肝脏理想的染色，采用了热修复。 肝细胞膜、胆管强而清晰的着色。背景干净。 第五页，共四十六页。 一、特异性染色的判断 1.特定的定位 细胞阳性——根据靶抗原不同而呈现胞膜型、胞浆型 或胞核型 间质阳性——表现为细胞外着色，局限性或弥散性 2.染色的不均一性 阳性细胞的染色分布不均，片状或点状散在分布 染色强弱不等，颜色深浅反映抗原量的多少 3.排除人为造成的非特异性染色 切片的折叠、刀痕，色素沉着，组织细胞坏死。 4.颗粒性显色 DAB显色在高倍镜下呈颗粒状而非均匀着色。 第六页，共四十六页。 免疫组化标准化照片 CK10 CD44v6 ER 第七页，共四十六页。 第八页，共四十六页。 第九页，共四十六页。 第十页，共四十六页。 第十一页，共四十六页。 第十二页，共四十六页。 合格的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提不合格的免疫组化染色切片容易导致误判 第十三页，共四十六页。 C-erbB-2 优 良 中 差 第十四页，共四十六页。 4 3 2 1 ER 第十五页，共四十六页。 子宫内膜PR染色，修复不足 子宫内膜PR染色，修复良好 PR 第十六页，共四十六页。 编号 阳性片 待检片 阴性对照 结论 1 2 3 4 5 － ＋ － ＋ ＋ － ＋ ＋ － ＋ － ＋ － － － 操作失误，抗体失效 非特异性着色 阳性片不含靶抗原 待检片不含定位抗原 待检片含定位抗原 二、染色结果的判断 第十七页，共四十六页。 PCNA S-P×400 S-P×400 1-day CM 4-day CM 阳性强度 　20×10视野下，随机选取5个视野，测100个阳性细胞的平均光密度即为此片的阳性强度。 三、结果分析 第十八页，共四十六页。 P53 阳性细胞百分比 计数100个瘤细胞，其中阳性细胞的比例： ＜5% （－） 5%~30% （＋） 30%~50% （ ＋ ＋ ） ＞50% （ ＋ ＋ ＋ ） 第十九页，共四十六页。 PCNA Barnes法 A：瘤细胞显色有无及深浅 0（不着色） 1（浅黄色） 2（棕黄色） 3（棕褐色） B：显色细胞的比例 1（1%~10%） 2（11%~50%） 3（51%~80%） 4（＞80%） 评分=A×B 0分：阴性 1~4分：弱阳性 ＞4分：强阳性 第二十页，共四十六页。 胶原染色 阳性面积百分比 40×10视野，选取5个视野，计算阳性区域面积占整个参考面积的百分率。 第二十一页，共四十六页。 CD34 Weidner法（MVD计数） 孤立的棕黄色细胞族代表一条微血管。 低倍镜下找到组织内密度最高区域。 40×10视野下计数微血管数目。 第二十二页，共四十六页。 K-ras VEGF 第二十三页，共四十六页。 附：定量分析——图象处理系统 1、图象处理： 利用仪器按照不同的目的进行图象的修正、变换、特征提取和测量。 1）“狭义”指消除图象的模糊不清部分，校正畸变。 2）“广义”包括对图象的结构分析，提取特征进行测量。 第二十四页，共四十六页。 2、图象处理系统组成 图象输入（显微镜、扫描仪） 图象处理运算（病理图文分析软件） 图象、数据输出 第二十五页，共四十六页。 3、图象处理系统功能 几何形态学定量分析 细胞核、浆的大小、面积、核浆比；