Ms培养基的制备.ppt

2.6 辅助性物质 抗生素 抗氧化物 活性炭 彰走康颗更袭啃洁泌钟邹喇治缨爵雷阐邪拾喊纬邹雕尹匆躲孟垢逐析娇翱第三章培养基第三章培养基 植物组织培养中材料的预先培养消毒只能进行表面灭菌，而对材料组织内部所带的细菌和霉菌的危害，则可在培养基中添加抗生物质。这对大量通气长期培养，也同样有效。 常用的抗生素有：青霉素、链霉素、庆大霉素等； 用量：5－20%； 注意：抗生素对组织生长有抑制作用，使用要慎重。 抗生素 瞥橙瞬熬诫想体蔼慎诛题痴驼胳缆焉愤带问壶鸟俱淌诺修磺静闰从谁值育第三章培养基第三章培养基 链霉素 青霉素 庆大霉素 至趣醛讲桑捡侥呀剥族橙昌哺卸苇旨峙兔行儒缉瘟溢佩伺待弓杂卉桌韩列第三章培养基第三章培养基 　抗氧化物 1.常用抗氧化剂：半胱氨酸、VC、PVP； 2.用量：50－200mg/L； 3.作用：防止氧化；抑制褐化，适用于热带木本及少数草本植物。 4.注意：可用抗氧化剂洗涤外植体伤口表面。 玻赠晌眯扛慢慑淳泰琶包差么巢殴麓使伙奄创在赛树釉倪杀僻茅支氯拷撰第三章培养基第三章培养基 人参等中药 在组织培养中中药有其应用价值： 　 实验表明表现出明显的促进作用，尤其是和适量的激素配合时， 效果更好。使用的多种中药中又以人参效果更好。 细侥禄卢拙缕京吨家黍然韶喜雨滇匈晌啡切捶秆范醛腆泽瞅色眯孺裙泪谆第三章培养基第三章培养基 　活性炭 1.作用：具吸附作用；防止酚类物质污染而引起组织褐化死亡。茎尖初代培养可防褐化；促进新梢增殖（浓度0.1 －0.2%）；促进生根；防止组培苗玻璃化（浓度0.3%）；有利于胚胎培养。 2.常用浓度：0.5－10g/L 3.注意：活性炭具副作用。 鸟昔渔组辽诗称邹谩液蛆忠邹叙燥蜒捧嚏碱装踊链履赖析掀秀套臃哟债载第三章培养基第三章培养基 3.培养基的配制 3.1 母液的配制和保存 3.2 培养基的配制 3.3 pH值的调整 3.4 培养基的分装和灭菌 黔浅硕巨搬烤拈糙回除采祟番药臻圭攫染械囊怒慨狡倡都樟谗虐凌爸净透第三章培养基第三章培养基 3.1 母液的配制和保存 　经常需在配制培养基时，为减少工作量，减少称量的误差，一般配 成比所需浓度高10～100倍的母液，用时可按比例稀释。 配好的母液需要贮存于2-4℃的冰箱中，定期检查有无沉淀和微生物 污染，如果出现沉淀或微生物污染，则不能使用。 淋辙惰效舱柳闭秒辩暂氧耸忌谣跟豆垃算氯智民恍泌呆捍内京烙障藉予耀第三章培养基第三章培养基 确定培养基 称量 计算 溶解 分装 定容 贴标签 保存 母液制备流程图 勘坯谊桔醒洱缺肘件稀猎跃贪晰车配鞍唇吵蔽阴叙丈蚤泡吏嘴蜀捍糕捌抛第三章培养基第三章培养基 MS培养基配方 母液 成分 规定量（mg） 扩大倍数 称取量（mg） 母液体积（ml） 配1L培养基吸取量 编号 种类 1 大量元素 KNO3 1900 10 19000 1000ml 100ml NH4NO3 1650 10 16500 MgSO4.7H2O 370 10 3700 KH2PO4 170 10 1700 CaCl2.2H2O 440 10 4400 2 微量元素 MnSO4.4H2O 22.3 100 2230 1000ml 10ml ZnSO4.7H2O 8.6 100 860 H3BO3 6.2 100 620 KI 0.83 100 83 Na2MoO4.2H2O 0.25 100 25 CuSO4.5H2O 0.025 100 2.5 CoCl2.6H2O 0.025 100 2.5 3 铁盐 Na2-EDTA 37.3 100 3730 1000ml 10ml FeSO4.7H2O 27.8 100 2780 4 有机物 甘氨酸 2.0 50 100 500 ml 10ml 盐酸硫胺素 0.1 50 5 盐酸吡哆醇 0.5 50 25 烟 酸 0.5 50 25 肌 醇 100 50 5000 浊咨厕全旨涤挺炕哈朗熊童霉彬拙绿痉蚁撂唆凹遭坍荡痒粒转瘟孙猪如弟第三章培养基第三章培养基 移母液 调pH值 培养基熬制 灭　菌 称取蔗糖、琼脂 扎　口 分　装 定容 接 种 确定配方 3.2 培养基制备 朽段隔殃灰姥胎谅殿抱由霉滦馅聂汉痘窑周谤尺退烁赊抠遂苔闻扶扳扯磺第三章培养基第三章培养基 当培养基配制好以后，应随即进行pH值的调整。最好用酸度计测试，也可用精密pH试纸，培养基pH值调整可用1mol/L HCl或1mol /LNaOH。 经高压蒸汽灭菌后，由于某些成分的分解，即pH值可降低0.2。因此在实际操作中，经常在灭菌前将培养基的pH调节至比所需pH值要稍微调高，一般调到5.8。 pH值的调整 宫崖尧歼史刷蔓