第十六章经典液相色谱法.pptVIP

* 第四节经典液相色谱法 （三）离子交换柱色谱法 固定相　离子交换树脂 　选择系数：用于衡量离子交换树脂的交换能力，交换容量大，树脂的交换能力强。 性能参数： 1、交联度：离子交换树脂中所含交联剂的量。 　用于衡量离子交换树脂的选择性，交联度大，树脂的网状结构紧密，网眼小，选择性好。 2、交换容量：实验条件下，每克干树脂真正参加交换的活性基团数。 第30页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第四节经典液相色谱法 流动相 　　水为溶剂的缓冲溶液。 应用 去离子水的制备，天然药物化学成分的分离，各种有机酸、氨基酸的分离制备，抗生素的纯制、去除干扰离子、测定某些盐类的含量等。 第31页，共44页，编辑于2022年，星期一 分析化学（第2版） 全国高职高专药品类专业卫生部“十一五”规划教材 第十六章经典液相色谱法 第1页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第一节概 述 第一节 色谱分析法概述 色谱法（chromatography）是一种根据物质的物理或物理化学性质不同而进行分离分析的方法。 第2页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第一节概 述 一、色谱法的发展概况 色谱法的创始人是俄国植物学家茨维特Tsweet。 20世纪30与40年代相继出现了薄层色谱和纸色谱，与柱色谱一起统称为经典的液相色谱法，使色谱法成为一门分离技术。 20世纪 50年代气相色谱的兴起，使色谱法在理论、仪器以及分离与“在线”分析等方面得到长足发展，奠定了现代色谱法的基础。 第3页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第一节概 述 20世纪 70年代高效液相色谱的崛起，弥补了气相色谱不能直接用于分析难挥发、对热不稳定及高分子试样等方面的不足，拓宽了色谱法的应用范围，成为色谱发展史上又一个里程碑 。 20世纪 80年代是色谱迅猛发展的重要时期，相继出现了液相色谱的各种联用技术 。 经过一个多世纪的发展，色谱法已成为重要的分离分析方法。 第4页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第一节概 述 二、色谱法的分类 （一）按两相的分子聚集状态分类 液相色谱法（LC）：流动相为液体的色谱法。 气相色谱法（GC）：流动相为气体的色谱法。 超临界流体色谱法（SFC）：是以超临界流体作为流动相的一种色谱法。 第5页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第一节概 述 （二）按操作形式分类 柱色谱法（CC）: 将固定相装于柱管内构成色谱柱，色谱过程在色谱柱内进行的色谱法，称为柱色谱。 平面色谱法: 色谱过程在固定相构成的平面层内进行的色谱法，称为平面色谱。 第6页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第一节概 述 （三）按色谱过程的分离机制分类 吸附色谱法（adsorption chromatography，AC） 分配色谱法（distribution chromatography，DC） 离子交换色谱法 （ion exchange chromatography，IEC） 空间排阻色谱法 （steric exclusion chromatography，SEC） 第7页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第一节概 述 三、色谱过程 色谱法具有相对运动的两相，其一是固定不动的，称为固定相（stationary phase）；而另一相则是携带试样向前移动的，称为流动相（mobile phase）。 色谱过程是物质在相对运动的固定相和流动相之间达到分配平衡的过程。例：顺式与反式偶氮苯的色谱过程。 顺式与反式偶氮苯的 色谱过程示意图 a. 加样 b. 洗脱 c. 继续洗脱 1.顺式偶氮苯 2. 反式偶氮苯 第8页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第二节 色谱法的基本概念 一、色谱图 色谱流出曲线 （一）基线 ：是在操作条件下，仅有流动相通过检测系统时所产生的信号曲线。 （二）色谱峰 ：色谱流出曲线上的突起部分。分为对称峰与不对称峰，后者又分为前延峰和拖尾峰。 第二节色谱法的基本概念 第9页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第二节色谱法的基本概念 色谱流出曲线和色谱峰区域宽度 第10页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第二节色谱法的基本概念 fs处于0.95～1.05之间为对称峰；小于0.95者为前延峰；大于1.05者为拖尾峰。 色谱流出曲线上，一个组分的色谱峰可用峰位、峰高或峰面积及色谱峰的区域宽度等三项参数描述，分别作为定性、定量及衡量柱效的依据。 峰高（h）：色谱峰顶至基线的垂直距离。 峰面积（A）：色谱峰与基线所包围的面积。 第11页，共44页，编辑于2022年，星期一 * 第三节基本色谱法的分离机制 吸附色谱过程就是组