《食品安全快速检测技术》教学课件—02快速检测技术分类.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 模块一 快速检测技术分类 掌握食品安全快速检测的基本技术类型。 熟悉 化学比色法检测试剂、ELISA试剂盒、胶体金试纸条构建的一般原理 了解生物芯片、生物传感器在食品安全快速检测中的意义和优势 本章学习目标和重点 项目一 理化快速检测技术 一、 化学比色技术 化学速测法主要是根据有机磷农药的氧化还原特性。有机磷农药（磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺）在金属催化剂作用下水解为磷酸及醇等，水解产物和检测液反应，使检测液的紫红色褪去变成无色。 化学比色技术是利用迅速产生明显颜色的化学反应检测待测物质，通过与标准比色卡相比较进行目视定性或半定量分析。 1 化学速测卡 目前比较常用的化学比色方法包括各种检测试剂和试纸，两者检测原理相同，在试纸上进行反应就是把化学反应从试管里移到滤纸上进行，按反应本质说，都是利用迅速产生明显颜色的化学反应定性或定量检测待测物质。化学比色分析法测定样品，主要是通过与标准比色卡比较，进行目视定性或半定量分析。 2 化学速测仪 随着检测仪器的不断发展，与其相配套的微型检测仪器也相应出现。与试剂检测方法相配套的微型光电比色计目前已发展的比较成熟， 适用范围 主要用于果、蔬、茶、粮食、水及土壤中有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测，特别适用于农产品质量检测站的快速检测，果蔬生产基地和专业户采摘前田间地头检测，农贸批发销售市场现场检测，酒楼、食堂、家庭果蔬茶加工前安全检测。 检测原理 便携式农药残留速测仪是根据国家标准方法GB/T5009.199-2003速测卡法（纸片法）而专门设计的仪器。仪器的检测原理是利用速测卡中的胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯水解为乙酸和靛酚，由于有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的活性有强烈的抑制作用，因此，根据显色的不同，即可判断样品中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况。 注意事项 ①本方法是生物化学反应，应尽可能避免一些物理和化学因素对酶活性的影响。 ②果蔬农药残留快速检测卡,是用对农药高度敏感的酶和基质做成的卡片，可以快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯这两大类用量较大、毒性较高的农药的残留情况，选用的酶对农药敏感，抗干扰性强，操作简便，可以不需要配制试剂，不需要专业的技术培训，任何仪器设备单独使用，也可配套农药残留快速检测仪使用，提高检测效率。产品容易贮存，携带方便，是做现场检测的最佳方法。 二、 酶抑制技术 酶抑制技术是利用有机磷和氨基甲酸酯类农药抑制胆碱酯酶（ChE）的特异性生化反应。酶抑制技术是研究比较成熟、在国内应用最广泛的速测技术之一。 胆碱酯酶主要分为乙酰胆碱酯酶（AChE）和丁酰胆碱酯酶（BChE），农药对其抑制由于来源不同而有差异，对农残的检测精度也因不同品种的农药产品而不同，包括酶抑制率法、速测卡法和酶生物传感器法。 1 酶抑制率法（分光光度仪法） 有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应产生黄色物质，在分光光度计410nm处有最大吸收峰；如果有农药抑制了酶的活性，就不能水解乙酰胆碱，与显色剂反应则无色，通过测定其吸光度即抑制率来确定酶活，进而确定农残量。 2 速测卡（纸片）法 胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色过程发生变化，导致酶片颜色呈浅蓝色或白色不变，与对照比较可判断出是否含有农药残留。 酶抑制技术检测农药残留操作简便、快速、灵敏、经济，样品无需净化，但此方法只能定性不能定量，在检测韭菜、生姜、葱、蒜、萝卜、辣椒、番茄时容易受干扰，只能用作有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的初筛。 3 酶生物传感器法 酶生物传感器（enzymlbiosensor, EBS）是以酶为敏感元件的一种传感器，主要由识别底物的固定化层和与之密切结合的信号转换器组成。其工作原理是酶催化底物转换成产物，产物被转换器检测并转换为可定量的信号输出从而达到检测被测底物浓度的目的。 目前用于农药残留检测的生物传感器类型有：电流型生物传感器、电位型生物传感器、电压生物传感器、光纤生物传感器等。 三、便携式色谱-质谱联用仪 随着与检测技术相关的各种配套装备的不断发展，近几年针对食品安全的检测车使以前根本无法应用到现场的一些检测方法得