《食品安全快速检测技术》教学课件—04兽药残留快速检测.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 模块三 兽药残留快速检测 学习目标 了解兽药残留所带来的食品安全问题、获得关于兽药残留的有关标准依据和检测试剂制造商信息等； 理解常见的兽药残留快速检测的基本原理； 掌握常见的兽药残留快速检测基本方法和基本操作技能。 兽药和兽药残留的定义 兽药 指用于预防和治疗畜禽疾病的药物。 兽药残留 指给畜禽使用兽药或添加剂后，药物以其原形及其代谢产物的形式蓄积或储存在动物的细胞、组织、器官或可食性产品（如蛋、奶）中。 兽药的分类 抗生素、磺胺药类、呋喃药类、抗球虫药、激素药类和驱虫药 兽药残留带来的食品安全问题 Text in here 多宝鱼 瘦肉精 项目一 兽药残留快速检测原理 一、微生物法快速检测兽药残留 微生物法检测动物性食品中抗菌药物残留的原理是根据抗菌药物对微生物生理功能、代谢的抑制作用，来定性或定量确定样品中药物残留。 一般选用不同的菌株和培养基，并在培养基中加入某些成分，利用抗菌药物对不同菌株敏感性的差异，以及影响药物活性的特定成分和培养条件来推断受检药物的化学结构。 优点：单个试剂盒分析样品数量大，操作便捷，灵敏度高以及对调价要求低，适用于养殖场和食品加工车间使用。 1、平皿法 2、生化检测法 二、免疫学方法快速检测兽药残留 基于抗原抗体特异性反应的检测原理。 分为： 放射免疫分析 荧光免疫分析 酶免疫分析 发光免疫分析 胶体金免疫分析 仪器免疫分析 无标记免疫分析 二、免疫学方法快速检测兽药残留 内容主要包括： 检测对象的选择 检测对象结构分析和免疫半抗原的合成 人工结合抗原的制备与鉴定 抗体的制备 检测方法的确立与方法评价 其中2,3 是免疫学方法建立的关键和技术难点 二、免疫学方法快速检测兽药残留 检测方法的确立包括以下： （1）胶体金免疫色谱实验测定法 （2）酶联免疫吸附测定法 （3）放射免疫及荧光免疫测定法 （4）生物感应器 项目二兽药残留检测卡和试剂盒 一、盐酸克伦特罗检测卡 1 适用范围 此方法应用于猪肉、内脏和猪尿液中盐酸克伦特罗含量的检测。 2 检测原理 本试剂运用抗原抗体的特异反应以及侧向层析和胶体金技术进行样品中克伦特罗分子的快速定性检测。 用BSA(牛血清白蛋白)偶联的克伦特罗分子与胶体金颗粒结合后，包被在醋酸纤维素膜上；在硝酸纤维素膜上将克伦特罗抗体和BSA抗体分别包被在检测区（T）和质控区（C）。当样本加到加样孔后，样本中的克伦特罗分子与克伦特罗-BSA-胶体金偶联物一起层析泳动到检测区竞争与克伦特罗抗体结合，剩余的克伦特罗-BSA-胶体金继续泳动到质控区与抗体结合。因此，当样本中的克伦特罗浓度超过一定量后，胶体金偶联物就不能与克伦特罗抗体结合，此时检测区不出现紫红色线条；当样本中克伦特罗浓度低于一定值或样本中没有克伦特罗时，胶体金偶联物就与克伦特罗抗体结合，从而在检测区显示出一条紫红色线条；而无论样本中是否含有克伦特罗分子，质控区都会出现紫红色线条，以示检测有效。 3 主要仪器 食品加工机，低速离心机，电子秤（精度0.1克），250ul单道微量移液器（移液枪）。 4 材料与试剂 克伦特罗胶体金法检测卡，检测试剂A（3%三氯乙酸溶液），检测试剂B（0.1N氢氧化钠溶液），pH试纸（1-14），剪刀，10ml试管（或离心管），一次性塑料吸管、一次性手套等。 5 操作步骤 （1）从原包装铝箔袋中取出检测卡，在1小时内应尽快地使用； （2）将肉或内脏样本用剪刀剪成碎条后放入食品加工机中用一字刀粉碎，秤取5g粉碎样本置于试管中，加入5毫升检测试剂A。盖上盖，摇匀，浸泡约10分钟； （3）用离心机离心装有浸泡液和样本的试管2分钟（3000rpm），用移液枪移取250μl上清液转移入2ml检测管中，加入极少量检测试剂B，调整pH值至7左右； （4）将盐酸克伦特罗检测卡片置于干净平坦的台面上，用塑料吸管垂直滴加3滴无空气样品处理液于加样孔内； （5）等待紫红色条带的出现，测试结果应在5分钟时读取。 6 结果判定 阳性（+）：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现； 阴性（-）：两条紫红色条带出现。一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）内； 无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或检测卡已变质损坏，应重新测试1次，如仍为此现象，应更换检测卡或联系供应厂家； 阳性结果表明盐酸克伦特罗含量在阈值以上，阴性结果表明盐酸克伦特