叶绿体的分离与荧光观察.ppt

细胞膜的渗透性 第23页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 目的要求 基本原理 实验用品 方法与步骤 实验结果 实验报告 第24页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验目的 1 了解细胞膜的渗透性 2 了解各物质进入红细胞的速度 第25页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验原理 当红细胞置于不同等渗溶液中时，由于对各种溶质的通透性不同，因此有的溶质分子可透入，有的溶质分子则不能透入，能透人的溶质分 子的速度也不同。当溶质分子进入红细胞使细胞 内溶质浓度增加时，导致水的摄人。 第26页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 红细胞膨胀 到一定程度时，细胞膜破裂，即红细胞发生溶血.由于溶质透人速度不同，溶血时间也不同。 第27页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验用品 试剂：0.17 mol／L氯化钠，0.17 mol／L 氯化铵，0.17 mol／L硝酸钠，0.12 mol／L硫酸 钠，0.12 mol／L草酸钠，0.12mol／L醋酸钠， 0.32 mol／L葡萄糖，0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇。 仪器：显微镜，载玻片，盖玻片，吸管，小烧杯，试管，试管架 第28页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验方法 1 、低渗溶液：取试管1支，加入10mL蒸馏水，然后再加入1 mL稀释的鸡血，注意观察溶液的颜色变化，溶液由不透明的红色变为红色透明，红细胞发生破裂，造成所有红细胞溶血，使光线容易通过。显微镜下观察溶血前后红细胞的形态。 第29页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 2 、鸡血红细胞的渗透性：取试管10支，分别加入上述10种溶液各10 mL，再 加入1mL稀释的鸡血，记下时间，轻轻摇动使混匀，注意是否发生溶血；若发生溶血，记录溶血过程所需的时间（自加入稀释鸡血到溶液变成红色透明澄清所需时间）。 第30页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验结果 不同的试剂导致细胞的不同反应。1，溶血，注意时间不同；2，不出现溶血，为什么？ 第31页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验报告 第32页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 细胞融合 第33页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 目的要求 基本原理 实验用品 方法与步骤 实验结果 实验报告 第34页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验目的 1.了解PEG诱导细胞融合的原理 2.掌握细胞融合技术 第35页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验原理 聚乙二醇(PEG)结构为：HOH2C(CH20CH2)nCH2OH，相对分子质量在200-6000均可，用作细胞融合剂。聚乙二醇分子能改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的 第36页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 表面张力作用， 从而使细胞发生融合，进而细胞质沟通，形成一个双核或多核细胞 第37页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验用品 1.器材：离心机，移液枪，水涡锅，载玻片，盖玻片，血细胞计数板，刻度试管，刻度吸管，电炉，冷冻离心管，显微镜，烧杯， 吸管 2.试剂：Alsever溶液，GKN溶液，0.85%生理盐水，50%PEG ，蒸馏水 第38页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 0.85％生理盐水：0.85g氯化钠溶于 100mL重蒸水中。 ALsver液： 葡萄糖 2.05g , 枸橼酸钠 0.8g , NaCl 0.42 加蒸馏水至100ml GKN液： NaCl 8g ，KCl 0.4g , Na2HPO4·2H2O 1.77g ， NaH2PO4·H2O 0.69g , 葡萄糖 2g ,苯酚红 0.01g 溶于1000ml蒸馏水中 第39页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 50％PEG混合液： 称取少许PEG(Mw 6000)放人刻度离心管内，在沸水浴中加热， 使其溶化，待冷却至50℃时，加入预热至50℃ 的等体积的GKN液，混匀。注意使用前配制。 第40页，共73页，2022年，5月20日，3点33分，星期四 实验方法 1.取新鲜的鸡血与Alsever溶液以1：4的比例混匀，可在冰箱内存放一周（4℃） 2.取1ml贮存鸡血加入4ml0.85%生理盐水，充分混匀800r/