第二十章比色法和分光光度法.pptVIP

4. 检测系统 作用：将光强度转化为电流进行测量。光电转换器对测定波长范围内的光有快速灵敏的响应，产生的电流应与光电转换器上的光强度成正比。 常用的光电转换器有硒光电池、光电管。 5.读数指示器 作用：把光电流或放大的信号以适当的方式显示或记录下来。 第29页，共57页，编辑于2022年，星期一 20.3.3 常用的几种分光光度计 72型、722型、751型等。 第30页，共57页，编辑于2022年，星期一 20.4 显色反应及显色条件的选择 20.4.1 对显色反应的要求 20.4.2 显色反应条件的选择 第31页，共57页，编辑于2022年，星期一 20.4.1 对显色反应的要求 将待测组分转化为有色化合物的反应叫显色反应。 显色反应有配位反应和氧化还原反应 。 1.灵敏度高 因为光度法一般用于测定微量组分含量，故通常选择灵敏度高的显色反应。生成的有色化合物摩尔吸光系数大，灵敏度高，通常 k 值达104~105，认为灵敏度较高。 2.选择性好 即显色剂只与一种或少数几种物质反应而显色。 3.有色化合物组成固定，化学性质稳定 4.显色剂在测定波长处无明显吸收 第32页，共57页，编辑于2022年，星期一 20.4.2 显色反应条件的选择 1．显色剂的用量 通常显色反应可用下式表示： M(被测离子) + HR(显色剂) MR + H+ 从平衡角度看，显色剂过量越多，越有利于有色配合物的形成。但显色剂过量太多，有时会引起副反应，故有一适宜用量，通常由实验确定。 固定其它条件，改变显色剂的浓度，测A，作A ~ c R曲线，选择原则：选择曲线上平坦部分 第33页，共57页，编辑于2022年，星期一 吸光度与显色剂用量关系曲线 cR cR cR A A A (a)适合进行光度分析(对显色剂浓度控制不严格) (b)只能选择较窄的显色剂浓度范围 (c)必须严格控制显色剂浓度。 第34页，共57页，编辑于2022年，星期一 2. 酸度 酸度对显色反应的影响是多方面的： H+浓度大，不利于有色配合物的形成；酸度还影响有些显色剂的颜色；某些被测组分与显色剂能形成不同组成的配合物；金属离子在酸度下降时会水解。 适宜的酸度范围由实验确定：固定其它条件，改变pH值测A，作A ~ pH曲线，选择曲线平坦部分对应的pH值作为测量条件。 第35页，共57页，编辑于2022年，星期一 吸光度与pH关系曲线 pH A 第36页，共57页，编辑于2022年，星期一 3．显色时的温度和时间 多数显色反应在室温下能很快进行，有些反应需要加热。多数显色反应须经一定时间才能完成，有些有色物质放置时受到空气和光的作用，颜色会减弱。 适宜显色时间可通过实验确定。 第37页，共57页，编辑于2022年，星期一 A t A t (2) (1) (1) 随着时间的增加，有色化合物的浓度增大，A增大。反应完成后，A保持不变。 (2)有色化合物性质不太稳定，随着放置时间的增加，在日光，空气的的作用下，有色化合物分解，浓度下降，A降低。 第38页，共57页，编辑于2022年，星期一 4. 溶剂的影响 许多有色配合物在水中解离度较大，而在有机溶剂中解离度较小。有些配合物易溶于有机溶剂。 5.干扰物质的影响及消除 干扰离子本身有颜色或与显色剂作用显色等，都将干扰测定。 消除干扰的方法有： (1)加掩蔽剂 (2) 选择适当的显色条件 如通过控制酸度，使干扰离子不作用 (3) 选择适当的测量条件 如波长、参比溶液等 (4) 分离干扰离子 第39页，共57页，编辑于2022年，星期一 20.5 分光光度法仪器测量误差及其消除 20.5.1入射光波长的选择 20.5.2 光度计读数范围的选择 20.5.3 参比溶液的选择 20.5.4 溶液浓度的测定 第40页，共57页，编辑于2022年，星期一 第1页，共57页，编辑于2022年，星期一 20.1 概 述 20.1.1 光度分析法的特点 20.1.2 物质对光的选择性吸收 第2页，共57页，编辑于2022年，星期一 20.1.1 光度分析法的特点 有色物质颜色的深浅和浓度有关，利用比较溶液颜色深浅来测定含量的分析方法称为比色分析法。 目视比色称为比色法；利用分光光度计测试，称为分光光度法。 光度分析法特点： (1) 具有较高的灵敏度。 一般物质可测到10-3~10-6 mol?L-1 (2) 有一定的准确度。 相对误差为2%~5% (3) 操作简便、快速，选择性好，仪器设备简单。 (4) 应用广泛。 第3页，共57页，编辑于2022年，星期一 20.1.2 物质对光的选择