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《食品毒理学》实验准备
实验所需仪器:分光光度计(比色皿)、水浴锅、离心机(离心管)、灌胃针、移液器、显微镜
沙利氏管、盖玻片、血细胞计数板
二、试剂配制
(一)所需器皿:电子天平、酸度计/pH试纸、移液管、滤纸、标签纸、玻璃棒、玻璃器皿
(二)所需药品:磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、丙酮酸钠、氢氧化钠、DL-丙氨酸、α-酮戊二酸、DL-天门冬氨酸、2,4-二硝基苯肼、三氯醋酸、水杨酸钠、三氯化铁、氯化钠
(三)试剂配制
Ⅰ、四氯化碳对肝脏谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)的影响实验
磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH7.4):取甲液420ml和乙液80ml,混匀。(→500ml,留下剩余液)
①甲液(0.1mol/L 磷酸二氢钠):取NaH2PO4·12H2O 35.82g,加蒸馏水溶解后稀释至1000ml。
②乙液(0.1mol/L 磷酸二氢钾):取无水KH2PO4 13.61g,加蒸馏水溶解后稀释至l000ml。
2、丙酮酸钠标准液(2mmol/L):→100ml
在100ml磷酸盐缓冲液中加22.0mg丙酮酸钠。
3、1mol/L、0.4mol/L氢氧化钠溶液:(→各500ml,留下1mol/L NaOH剩余液)
先配1mol/L NaOH(称取NaOH 20g,用蒸馏水溶解后稀释至500ml即得
以1mol/L NaOH 稀释配成0.4mol/L NaOH。
4、SGPT基质液:→100ml
精确称取DL-丙氨酸1.79g和α-酮戊二酸29.2mg,放于100ml烧杯内,加入少量(约15m1)磷酸盐缓冲液及使其溶解,并加1mol/L的NaOH溶液约0.5ml,调pH至7.4,再放入100ml容量瓶内,用磷酸盐缓冲液定容,4℃冰箱保存,此液每升含α
5、SGOT基质液:→100ml
在100ml的烧杯中加入29.2mgα-酮戊二酸和2.66gDL-天门冬氨酸,溶于磷酸盐缓冲液少量(约15m1),用1mol/LNaOH调节pH为7.4,移入100ml容量瓶中,用磷酸盐缓冲液定容,4℃温箱保存。此液每升含α
6、2,4-二硝基苯肼液(1mmol/L):→100ml
称取20mg 2,4-二硝基苯肼,先溶于10ml盐酸(可加热助溶),再以蒸馏水稀释至100ml,盛于棕色瓶内备用。(有沉淀可过滤)
7、10%四氯化碳植物油溶液:→10ml
Ⅱ、水杨酸钠半减期测定
1、10%三氯醋酸溶液:500ml
2、10%水杨酸钠溶液:100ml;0.02%水杨酸钠:100ml;
3、10%三氯化铁溶液100ml;(有沉淀可过滤)
4、肝素钠
Ⅲ、红细胞计数
1、0.85%氯化钠溶液:100ml
附:配置液体
磷酸盐缓冲液 500ml,留余液
丙酮酸钠标准液 100ml
1mol/L氢氧化钠溶液 500ml,留余液
0.4mol/L氢氧化钠溶液 500ml
SGPT基质液 100ml
SGOT基质液 100ml
50%四氯化碳植物油溶液 20ml
2,4-二硝基苯肼液 100ml
10%三氯醋酸溶液 500ml
10、10%水杨酸钠溶液 100ml
11、0.02%水杨酸钠 100ml
11、10%三氯化铁溶液 100ml
12、0.85%氯化钠溶液 100ml
13、肝素钠 若干
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