高效液相色谱法测定苯甲酸的不确定度分析报告.docxVIP

食品（金标特级生抽）中苯甲酸含量测量不确定度评定报告 报告编号： NT-BQ-2010-02 编制： 日期： 年 月 日 批准： 日期： 年 月 日 济宁耐特食品有限公司品管部实验室 济宁耐特食品有限公司品管部实验室 测量不确定度评定报告 济宁耐特食品有限公司品管部实验室 测量不确定度评定报告 PAGE PAGE # 食品（金标特级生抽）中苯甲酸含量测定 测量不确定度评定报告 一、 概述 1 ?样品编号：100771 ;环境条件：温度20C ;相对湿度40% 检测仪器设备： 2.1高效液相色谱仪 Waters e2695设备编号SB-05-082,定量重复性0.7%; 2.2分析天平XS105,设备编号SB-05-087,精细量程0~41g,最小分度值0.00001g, 0~50g 示值误差为±）.00001g； A级刻度吸管，1mL，允差为±0.007mL; A级容量瓶，100 mL，允差为±0.1mL; A级容量瓶，50mL ,允差为±）.05mL 检测试剂： 3.1苯甲酸标准品：购自中国药品生物制品检定所； 3.2乙酸铵（分析纯）、色谱级甲醇、超纯水。 检测依据：GB/T5009.29-2003《食品中山梨酸、苯甲酸的测定》 检测人员：相丽新 检测时间：2010年12月02日 二、 检测原理 依据GB/T5009.29-2003,样品经前处理后，进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后， 根据保留时间和峰面积进行定性和定量。 三、 测量步骤 3.1苯甲酸标准使用液的配制 3.1.1标准贮备液 将苯甲酸标准品从冰箱中取出放置到室温，准确称取 50.0mg,置于100mL容量瓶中， 用色谱甲醇溶解并定容，摇匀，冷藏于冰箱，作为标准品贮备液。 3.1.2 10ug/mL苯甲酸标准使用液 将苯甲酸标准贮备液从冰箱中取出放置至室温， 准确吸取1.00mL,至50mL容量瓶中， 用50%甲醇水溶液定容，混匀后备用。 3.2样品前处理 移取1mL金标特级生抽酱油于去皮烧杯中准确称量，先后加入超纯水， 2%氢氧化钠 溶液、10%硫酸铜溶液5mL,絮凝沉淀去除蛋白等杂质后，用超纯水定容至 50mL，摇匀, 取适量样品于10000r/min的条件下高速离心3min，上清液经0.45um滤膜过滤后，作为待 检测样品，同时做空白对照。 3.3试样测定 按Waters高效液相色谱操作规程规定的程序开机平衡系统， 待基线稳定后，取制备好 的待测样品液进样分析，记录色谱图，用面积百分比法计算检测结果。 4数学模型 试样中苯甲酸含量计算公式如下： 、一 AxCsxV X1 = mx As 汇 1000 式中：Xl-样品中苯甲酸含量，单位为克每千克（g/kg）； A样品液中苯甲酸峰面积； A s标准使用液中苯甲酸峰面积； Cs标准使用液浓度，单位微克每毫升（卩g/nL） V样品最终定容体积，单位为毫升（mL） m样品质量，单位为克（g） 5测量不定度来源 5.1称取样品质量产生的不确定度Um ； 5.2试样前处理定容时引起的不确定度 Uv； 5.3标准溶液配制引起的不确定度 ucs； 5.3.1容量瓶定容引起的不确定度 5.3.2分度吸管移液引起的不确定度 5.4平行试验重复性产生的不确定度 U0 ； 5.5测量时由Waters高效液相色谱仪产生的不确定度 U1 ； 6不确定度传播律 采用相对标准不确定度合成公式计算： N Uyi2（y）二 Uyi2（Xi） \=1 7测量结果及标准差 对配制好的10ug/mL的苯甲酸标准品进行了六次重复测量， 其测量结果及标准偏差如 表 表 7-1： 表7-1苯甲酸标准品峰面积六次重复测量结果 序号 样品浓度 (ug/mL) 保留时间 (min) 峰面积 (伏.秒) 1 10 3.947 243852 2 3.941 268841 3 3.935 270604 4 3.938 268756 5 3.935 270675 6 3.934 268330 平均值 3.938 265176 标准偏差 0.005 10493.91 在重复性条件下，对金标特级生抽样品进行八次测量，八次测量数据如表 7-2: 表7-2八次平行测量结果 序号 样品质 量(g) 定容体积 (mL) 样品峰面积 (伏.秒) 标准品峰面 积(伏秒) 标准品浓度 (ug/mL) 计算结果 (g/kg) 1 1.19172 50.00 316670 265176 10.0 0.501 2 1.19579 50.00 323644 265176 10.0 0.510 3 1.19327 50.00 322766 265176 10.0 0.510 4 1.19170 50.00 318555 265176 10.0 0.504 5 1.19172 50.