SDS-PAGE电泳试剂配制.pdfVIP

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2022-09-16 发布于海南
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SDS-PAGE电泳试剂配制.pdf

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SDS电泳试剂 1) 30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr ）29.0g ，亚甲基双丙烯酰（Bis ）1.0g ，混匀后加 ddH O ， 2 37 C 溶解,定容至 100 mL,棕色瓶存于 4 C ； O O 2) 1.5M Tris-HCl(pH 8.8) ：Tris 18.17g 加 ddH O 溶解,浓盐酸调 pH 至8.0,定容至 100mL ； 2 3) ： 1M Tris-HCl(pH 6.8) Tris 12.11g 加 ddH O 溶解,浓盐酸调 pH 至 6.8,定容至 100 mL ； 2 4) 4分离胶缓冲液： 0.4gSDS 溶于 1.5M Tris-HCl(pH 8.8) ，定容至100mL ； 5) 4浓缩胶缓冲液： 0.4gSDS 溶于 1M Tris-HCl(pH 6.8) ，定容至100mL ； 6) 10电泳缓冲液(pH 8.3) ：Tris 3.029g ，甘氨酸14.415g ，SDS 1g 加 ddH O 溶解,定 2 容至 100mL ； 7) 10%过硫酸铵（Aps,现配）： 1g A 加 ddH O 至 10mL ； 2 8) 2SDS 电泳上样缓冲液： 1M Tris-HCl(pH 6.8)2.5mL ，-巯基乙醇 1.0mL ，SDS 0.6g ， 0.1%溴酚兰 1.0 mL ，ddH O 3.5mL ；甘油 2.0 mL ， 2 9) 考马斯亮兰染色液：考马斯亮兰 R 1.25g ，甲醇225 mL ，冰醋酸50 mL ，ddH O 250 2 225mL ； 10) 脱色液: 甲醇、冰醋酸、ddH O 以 2 ∶1∶7 配制而成； 2 11) 分离胶(12.5%): ddH O 4mL ，30%储备胶 5 mL ，4分离胶缓冲液 3mL, 10% Aps 2 0.1mL(现配) ，TEMED(N,N,N’,N’-四甲基乙二胺)10μL ； 12) 浓缩胶（5％）： ddH O 2.65mL ，30%储备胶 0.85mL ，4浓缩胶缓冲液 1.25mL ， 2 10%Aps 50μL ，TEMED 5μL。 2022年-2023年（可修改编辑） Tricine （三羟甲基氨基甘氨酸）- SDS - PAGE蛋白质电泳 1 Tricine - SDS - PAGE蛋白质电泳溶液准备 1 ）正极缓冲液(10 ×) ：14g Tris 溶于400mL 重蒸水,用1. 0M HCl 调至pH8. 9 ,定容至 500mL。 2 ）负极缓冲液(10 ×) ：将60. 55g Tris ,89. 58g Tricine 及5g SDS 溶于400ml 重蒸水中, 加水至终体积为500mL。 3 ）