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紫外分光光度法测定苯甲酸
?实验目的
.掌握吸收曲线的测定与絵制方法
.学习运用直接比较法求样品含量
3.掌握752型分光光度计的使用方法
二基本原理
样品中的苯甲酸在碱性条件下形成苯甲酸盐。苯甲酸及其盐对紫外光有选 择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm左右。
用752型分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可 定量测定物质含量。
三仪器与试剂
（-）仪器
752型分光光度计，1cm石英吸收池一套，50ml容量瓶二只，刻度吸管
5ml、10ml各一支，滴管一支
（-）试剂
O.Olmol/LNaOH 溶液：
苯甲酸标准贮备液：
精确称取分析纯苯甲酸100mg （预先经105°C烘干），用O.lmol/LNaOH溶 液100ml溶解后，再用蒸馅水稀释至1000ml0此液lml相当于O.lmg苯甲酸。
苯甲酸标准溶液：
取苯甲酸贮备液4.00ml,置于50ml容量瓶中,用O.Olmol/LNaOH溶液定 容，摇匀。此液lml相当于8昭苯甲酸。
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四操作步骤
.苯甲酸吸收曲线的绘制
测定条件：
気灯，1cm石英比色皿，苯甲酸标准溶液，O.Olmol/LNaOH为参比液测定波 长(nm):
从210nm240nm每隔一定波长(2nm~5nm)测定一次吸光度，在225nm 左右隔lnm测定一次吸光度。用以上波长为横坐标，测得的吸光度为纵坐标绘 制苯甲酸的紫外吸收曲线。
.直接比较法测定样品溶液中苯甲酸的含量
取10.00ml样品溶液,置于50ml容量瓶中，用O.Olmol/LNaOH溶液定容, 摇匀后备用。
在上述吸收曲线中找出最大吸收波长，用此波长作为定量分析的测定波 长。以
O.Olmol/LNaOH溶液为参比液，在完全相同的条件下测定苯甲酸标准溶液和 稀释后样品溶液的吸光度。
五数据处理按下式计算样品溶液中苯甲酸的浓度：
Cx( g/ml) AxA
s C
s 50
10 AxA
s 8 5
式中C
x是待测样品液的浓度；C
s是苯甲酸标准液的浓度；A
x是待测样品液的吸光度；A
s是苯甲酸标准液的吸光度。
六注意事项
1 .在测定时应将光闸拉出，不测定时立即将光闸推入，以保护光电管。
2.当外界电压波动较大时要用电子交流稳压器，且随时观察并校正暗电流。 思考题
L比较722型分光光度计与752型分光光度计在结构和测量方法上有何异同 点？
2.测定苯甲酸吸收曲线时，必须使用苯甲酸标准溶液，为什么？
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