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焦化废水强化处理的方法 本研究以某焦化厂废水处理系统曝气池中的活性污泥为菌源，筛选到1株对喹啉具有高效降解能力的acidovoraxsp.菌株，发现该菌能同时降解异喹啉、苯、吡啶、苯酚等广泛存在于焦化废水中的芳香族化合物，并将其应用于实际焦化废水的处理，以期为后期利用该菌对焦化废水进行生物强化处理的工业化应用提供良好的生物材料和技术支持. 1材料与方法 1.1实验材料 1.1.1实验菌源 1.1.2培养基 对文献[21]所提供的无机盐培养基配方进行改良，在微量元素储备液中去掉nicl2·6h2o和cocl2·6h2o，改良的喹啉无机盐培养基配方如下：na2hpo44.26g，kh2po42.65g，mgso4·7h2o0.2g，cacl20.02g，mnso4·7h2o0.002g，微量元素储备液1ml(主要成分：fecl2·4h2o1.5g·l-1，cucl2·2h2o0.002g·l-1，mnso4·7h2o0.1g·l-1，na2moo4·2h2o0.024g·l-1，zncl20.006g·l-1，h3bo30.07g·l-1)，去离子水1000ml，ph=7.0.灭菌后加入一定量喹啉(0.22μm微孔滤膜过滤)作为菌种生长的唯一碳源和氮源. lb培养基：酵母膏5g，蛋白胨10g，nacl10g，琼脂粉10g，蒸馏水1000ml，ph=7.0. 1.2菌种的筛选分离 将收集的活性污泥样品重新加入无菌水中，在30℃、150r·min-1的来靠培养箱中培育24h，静置后挑10ml上层清液注射于90mllb培养基中培育24h;然后以喹啉为唯一碳源和氮源，按10%的注射量将培养液桥接至无机盐培养基上展开反反复复驯养.喹啉溶液的起始浓度为50mg·l-1，以50mg·l-1梯度逐渐减小喹啉浓度至1000mg·l-1，甄选可以在改进的喹啉无机盐培养基上展开生长的菌落，经平板划线法拆分提纯获得氢铵菌落. 1.3菌种鉴定 形态学观测.将最终甄选获得的纯菌落划线注射于lb液态培养基，30℃倒转培育24h，观测菌落形态;挑取菌体展开革兰氏染色，用荧光倒转显微镜(leicadmi400b)观测菌体形态特征. 生理生化实验.参照文献[22]进行实验并对菌种进行鉴定. 分子生物学鉴别.菌种的分子生物学鉴别由大连takara生物工程公司顺利完成，通过对该菌株的16srrna基因展开扩充后对扩充产物展开测序，获得的序列与genbank数据库中的相似序列展开blast比对，从而确认其分类地位. 1.4分析方法 1.4.1菌体生物量的测量 采用称重法测量，取5ml发酵培养液，用带有0.22μm滤膜的针筒式过滤器进行过滤，经蒸馏水洗涤3次，80℃烘干至恒重后测量. 1.4.2喹啉水解率为的测量 参考文献[23,24]，采用紫外可见分光光度计(biol-140，美国pe)在277nm下检测样品中喹啉浓度.以未加菌的灭菌喹啉无机盐培养基为空白对照，将喹啉初始浓度记为a0，t时间后的喹啉浓度记为at，则： 1.4.3cod水解率为的测量 采用密封催化消解法[25]，利用化学耗氧量测定仪(hh-6型，中国姜堰)进行cod的测定.将溶液初始cod记为c0，t时间后cod记为ct，则： 1.5环境因素对dqs-01菌水解性能的影响 挑取纯培养菌落接种于500mllb培养基中过夜培养，使菌体活化及增殖.将该菌液4000r·min-1下离心，沉淀用无菌水清洗3次以去除表面杂质，再转移至无菌水中制备成一定浓度的菌悬液(生物量为150mg·l-1左右).按一定的接种量加入到喹啉无机盐培养基(喹啉初始浓度为300mg·l-1)中，在不同摇瓶转速、初始ph、温度下振荡培养.每组实验做三组平行试样，以未加菌的喹啉在同等条件下作为空白对照. 1.6dqs-01菌水解五音范围分析 以苯酚、苯、喹啉、异喹啉、吡啶为碳源底物，(nh4)2so4为氮源，调整培养基中碳源与氮源的含量，使菌体生长初始c/n为5/1，取接种量5%，35℃、150r·min-1振荡培养.同时设未加菌的灭菌培养液为空白对照. 1.7dqs-01菌对实际焦化废水的生物加强实验 1.7.1mbbr的启动挂膜及稳定运行 使用轻易低浓度启动摆膜方法[26,27]，将源自焦化厂曝气池污泥放在实验室自造的mbbr反应器中[28]，空气冷却24h(空气冷却量为0.3m3·h-1，以下同)，将焦化厂调节池水用蒸馏水吸收，并使其cod浓度约为150mg·l-1，重新加入填料(mutagbiochiptm，德国)展