SOP-WSW-017《微生物实验室内人员比对标准操作规程》.pdf

1.目的 保证室内人员检测结果的一致性和正确性，保证微生物实验室稳定运行。 2.适用范围 在岗职工、具有某项目检测资质的其他工作人员，包括新员工、轮科人员等。 3.职责 微生物组长应负责工作人员比对的策划、操作流程、结果判读及总结。 4.程序 4.1比对项目：由多人进行的手工检验项目需要进行人员比对，至少包括显微镜检查、培 养结果判读、抑菌圈测量和结果报告。实验室若开展直接抗原试验或手工方法感染血清学检 查，宜进行人员比对。 4.2比对频率及时间：每年2次，通常为上半年、下半年各一次（两次人员比对时间间隔 不宜超过6个月）。每次至少使用5份临床样本（含阳性结果）进行2人以上检验人员的结果 比对、考核并记录。若涉及的比对项目标本量不够，可酌情延长单项比对时间。 4.3比对方法：采用常规实验室检测方法。 4.3.1显微镜检查：方法为选取菌种或标本进行革兰染色后，由所有参与比对人员报告镜 下所见。每次比对至少选择5个样本，其中涂片革兰染色镜检查细菌（不需浓缩的标本）的 标本类型为尿、便、上呼吸道标本、下呼吸道标本、阴道分泌液和脓汁。浓缩集菌涂片革兰 染色镜检查细菌（需浓缩的标本）的标本类型为胸水、腹水和脑脊液。 4.3.2培养结果判读：方法为选取实验室已接种的平板，由所有参与人员报告菌落生长情 况（包括菌量、有无溶血、选择性培养基上菌落挑选等），提出处理意见（涂片、分纯、上 机、手工生化、药敏、无菌生长、继续培养24小时等）。 4.3.3K-B法药敏试验抑菌圈测量：将菌株接种于MH平板或血平板上，贴合适的药敏纸片， 置35℃培养18~24小时后阅读结果。 4.3.4结果报告：对指定标本的培养和药敏结果进行报告，宜包括痰液、粪便等有菌部位 标本的病原菌报告和特殊药敏机制的报告。 4.4比对结果判断：所有结果均由授权人（高年资微生物检验人员）确认比对结果正确与 否进行比较。其中符合率为单一测试所有人员与一位授权签字人比较；正确率为操作者对一 个项目的总正确率。符合率和正确率均在80%以上视为合格。不合格人员需进行相关知识和 技术的培训。 4.4.1显微镜检查 4.4.1.1查见革兰阳性球菌、阴性球菌或革兰阳性杆菌、阴性杆菌，疑似某某细菌。 4.4.1.2未查见细菌。 4.4.1.3痰涂片标本还应在低倍镜下观察白细菌、上皮细胞数量，再于油镜下观察细菌的 形态、排列、革兰染色属性，疑似某某细菌，同时观察有无真菌孢子及菌丝、脱落细胞或白 细胞吞噬现象等。除判断标本质量外，于高倍镜下观察有无寄生虫。 4.4.2培养结果判读 4.4.2.1找出有临床意义的致病菌。 4.4.2.2疑似某种致病菌或条件致病菌。 4.4.2.3选择初步鉴定关键试验（氧化酶、葡萄糖O/F管、触酶、血浆凝固酶、杆菌肽、 Optochin等）。 4.4.2.4根据革兰染色、初步关键试验，选择某种鉴定板条上机鉴定。 4.4.2.5若平板上仅有正常菌群生长，则继续培养24小时再观察。 4.4.2.6培养结果判读以主要致病菌如卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌等不漏检，条件致病菌 以优势菌至少1种符合，并且不报告无意义的菌为比对合格，由授权人（高年资微生物检验 人员）确认比对结果正确与否。 4.4.3K-B法药敏试验 4.4.3.1 用游标卡尺测量某一药敏平板中指定抗生素纸片的抑菌圈直径，记录结果。 4.4.3.2以授权人（高年资微生物检验人员）量取的抑菌圈直径（mm）±1mm为正确。 4.5记录保存：人员比对结束后，应整理原始数据、汇总结果、总结报告。经质量主管审 核后签字批准并存档保存。经授权后可查询数据和报告。 4.6备注 4.6.1凡在细菌室工作的检验人员均需定期进行能力比对。 4.6.2比对不合格的人员要暂停相关工作并接受培训，考核合格后可继续岗位工作。