[入室考试]入室考试复习.pdfVIP

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㈠、分光光度法是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的一项 技术。 特点: ①灵敏度高、精确度高; ②操作简便、快速;③对于复杂的组分系 统,无须分离即可检测出其中所含的微量组分。 分光光度法所使用的光谱范围主要是波谱图中 200 ~1000nm 这一段波长的光 谱。 紫外光区:200 ~400nm 可见光区:400 ~760nm 红外光区:760 ~1000nm 分光光度计使用的注意事项 试管架或试剂瓶不得放置于仪器上,以防试剂溅出腐蚀机壳。 拉杆动作要轻,防溶液溅出,腐蚀机件。 比色杯应持其侧壁的毛玻璃面。 盛液时不能太满(约达比色杯 2/3 体积),外壁如有液体,只能用滤纸沾去水 份,再用擦镜纸擦干净。 测毕,比色液一般应倒回原试管中,直至计算无误后方可倒掉。 ㈡、按转速分类:分为低速离心机、高速离心机、超速离心机 1. 低速离心机: T 转速在 10000rpm 以内或相对离心力在 15000 ×g以内 T 实验室中常用于细胞和大分子的分离制备。 2. 高速离心机: T 转速在 10000-30000rpm 以内或相对离心力在 15000-70000×g 以内 1 读万卷书 行万里路 T 常用于生物大分子的分离制备 3. 超速离心机: T 转速在 30000rpm 以上或相对离心力在 70000×g 以上。 T 常用于分离亚细胞器、病毒粒子、DNA、RNA 和蛋白质分子。 据离心机的用途可分为:分析型,制备型和分析制备型。 2. 差速离心 a、差速离心法可以用来分离细胞,亚细胞结构或高分子。差速离心比较 适用于差异比较明显的细胞或细胞器的分级分离,经过多次离心可以获 得满意的效果。 原理: 利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别,在同一离心条件下,沉降速 度不同,通过不断增加相对离心力,使一个非均匀混合液内的大小、形 状不同的粒子分部沉淀。 b、密度梯度离心也称区带离心法。是将样品加在惰性梯度介质中进行 离心沉降或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位 置上,形成不同区带的分离方法。 等密度梯度离心 等密度离心法也叫沉降平衡法。所谓等密度是指样品密度与介质的密度 相等,实际上是在梯度密度介质中进行的。 ㈢、气溶胶 (aerosols) :悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子(粒径一 般为 0.001~100μm )形成的相对稳定的分散体系 ㈣一级防护屏障:是通过生物安全柜、负罩等实验设备和个人防护装备实现的,操作者 2 读万卷书 行万里路 和被操作对象之间的隔离。 ㈤、PCR 仪使用方法 (1) 首先准备好反应管; (2) 打开机盖,将反应管平稳、端正地置入,盖好机盖; (3) 打开电源开关,按照机器屏幕显示的提示设定程序。 (4) 运行程序。 PCR 仪维护常识。 1、打开 PCR 仪机盖开关要轻,防止损坏盖锁,PCR 仪工作时严禁打开机盖。 2、使用完毕后,看 BLOCK 上和样品槽中是否有冷凝水,如有用吸水纸吸干。 3、严禁过夜。样品在机子上的保存温度建议设室温。 4、保持台面干净,定期清理底座的灰尘。保持良好的升降温速度。 3 读万卷书 行万里路 5、定期清洗仪器的外表面和热盖,定期用肥皂水清洗仪器的样品槽,不能使用 强碱,高浓度酒精和有机溶液擦洗。 ㈥、电子天平使用方法 一.准备 1.将天平放在稳定的工作台上,避免振动,气流、阳光直射和剧烈的温度 波动。 2.安装称盘,调整水平调节脚,使水泡位于水准器中心。 3.为获

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