大规模动物细胞培养技术在兽用生物制品的研究进展.doc

大规模动物细胞培养技术在兽用生物制品的研究进展 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 2 文1：大规模动物细胞培养技术在兽用生物制品的研究进展 2 一、动物细胞培养方法 3 1.贴壁培养 3 2.悬浮培养 3 3.动物细胞的大规模培养 3 4.用于病毒生产的细胞系的选择 5 二、动物细胞生物反应器 5 2.贴壁培养用生物反应器 6 3.包埋培养用生物反应器 6 三、生物反应器细胞培养工艺的选择 6 1.批次培养 6 2.流加培养 7 3.灌注培养 7 四、生物反应器动物细胞培养放大工艺 8 1.纯悬浮培养放大工艺 8 2.微载体培养放大工艺 8 文2：等速技术在康复医学领域中的进展 9 1在康复评定中的应用 9 1.1肌力评定 9 1.2关节稳定性评定 10 1.3双侧肢体平衡性评定 10 1.4辅助诊断 10 2康复训练模式 10 2.1等速向心训练 11 2.2等速离心训练 11 2.3CPM 11 2.4等速短弧训练模式 12 2.5其他模式 12 3在疾病康复中的应用 12 3.1神经科 12 3.2骨科 13 3.3其他疾病 14 4禁忌症 14 参考文摘引言： 15 原创性声明（模板） 16 文章致谢（模板） 16 正文 大规模动物细胞培养技术在兽用生物制品的研究进展 文1：大规模动物细胞培养技术在兽用生物制品的研究进展 动物细胞培养开始于本世纪初 1962 年， 其规模不断的扩大， 发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，， 而大规模动物细胞培养技术已经成为生物技术制药中非常重要的环节。目前， 大规模动物细胞培养技术在兽用生物制品上面，也已经开始了一些大规模的生产应用，细胞大规模培养技术作为行业技术升级改革的重要内容，农业部自2012年2月1日起，停止受理转瓶培养生产方式的的兽用细胞苗生产线项目兽药GMP验收申请。因此，传统转瓶工艺的应用越来越受到限制使用。自从20世纪60年代微载体生物反应器培养技术建立以来，国外许多国家对其在疫苗生产中的应用进行了广泛研究，细胞悬浮培养已是当前国际上生物制品生产的主流模式。动物细胞有悬浮培养和贴壁培养两种，技术水平的提高主要集中在培养规模的扩大、细胞培养环境的优化、细胞特性的改变、不断提高产品的产量及保证其质量上。本文就大规模动物细胞培养技术在兽用疫苗上的应用进行综述，分析了其在?F用生物制品产业的发展趋势。 一、动物细胞培养方法 1.贴壁培养 贴壁培养是指细胞贴附在某种载体上，载体悬浮在反应器里的培养方法，一切贴壁型细胞都能够适用于贴壁培养。在实际生产中具有贴壁生长特性的细胞种类较多，如CHO细胞、PK―15细胞、ST细胞和Vero细胞等。由于贴壁细胞具有贴壁的要求，提高细胞的密度就是使细胞培养规模最大化的有效方法。传统的贴壁细胞培养包括方瓶、扁瓶、转瓶等。但是由于其不能有效监控细胞的生长，操作比较复杂，所占空间大，劳动量也大，贴附面积具有限制性，在实际生产使用中受到极大的限制。目前，贴壁细胞的微载体培养在细胞生产中得到广泛的应用。 2.悬浮培养 悬浮生长的细胞其培养和传代都十分简便，细胞经过一定程度的驯化培养后，直接悬浮在适宜的液体培养基中，置于特定的培养条件下即可良好的生长。传代时也不需要再进行分散，只需要添加一定比例的培养基即可继续生长。目前用于悬浮培养的细胞也在逐渐增加，以前主要有昆虫细胞和杂交瘤细胞等，现在发展到BHK-21和sk6细胞等，悬浮培养培养的规模大，操作工艺也简单，培养的细胞增殖快，而且产量高，是大规模培养动物细胞的首选模式之一。 3.动物细胞的大规模培养 动物细胞大规模培养技术是建立在贴壁培养和悬浮培养的基础上，参考了早期的流式细胞培养术、融合了固定化细胞培养技术、填充床培养技术、更是汇合了人工灌流和搅拌系统等生物反应器培养技术发展起来的，目前已广泛用于生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体等，已成为医药生物高技术产业的重要组成部分。目前较成熟且有应用价值的规模化培养方法主要包括：中空纤维法、微囊法和微载体法等。 空心纤维法：空心纤维培养法是Richard krrcazek等在1972年创建的，最初使用的空心纤维是由醋酸纤维素和硝酸纤维素混合组成的可透性滤膜，外径约为1/3～3/4mm，表面具有海绵多孔结构，能水分子、营养物质和气体透过，也能让细胞贴附在上面生长。这种培养系统的核心部分是由3～6层这样的空心纤维组成的，培养时将待培养细胞接种于空心纤维的外腔，培养一段时间后，当细