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* * 老年痴呆动物模型 小组成员：****** 老年痴呆症简介 所谓老年痴呆症，又称阿尔茨海默(Alzheimer‘s disease,AD)， 是发生在老年期及老年前期的一种原发性退行性脑病，指的是一种持续性高级神经功能活动障碍，即在没有意识障碍的状态下，记忆、思维、分析判断、视空间辨认、情绪等方面的障碍。 疾病类型：1、血管性痴呆症，这类型的痴呆症多为血管病变所导致 2、脑神经细胞退化性的痴呆症 意识障碍：高级神经中枢功能活动受损，表现对周围环境及自身状态的识别和觉察能力出现障碍。 意识：是中枢神经系统对内外环境中的刺激具有的有意义的应答能力。 细胞：是一切生物的形态结构和功能活动的基本单位；是构成生物有机体的基本结构单位；是代谢与功能的基本单位；是生物有机体生长发育的基本单位；是遗传的基本单位。 其特征性病理变化：为大脑皮层萎缩，并伴有β-淀粉样蛋白 (β-amyloid,β-AP) 沉积，神经原纤维缠结 (neurofibrillary tangles , NFT) ，大量记忆性神经元数目减少，以及老年斑 (senileplaque,SP) 的形成。 以下介绍老年痴呆小 鼠模型 萎缩：是指已发育正常的实质细胞、组织或器官体积缩小，可以伴发细胞数量的减少。 淀粉：一类多糖，是葡萄糖残基的同聚物。有两种形式的淀粉：一种是直链淀粉，是没有分支的，只是通过α-（1→4）糖苷键的葡萄糖残基的聚合物；另一类是支链淀粉，是含有分支的，α-（1→4）糖苷键连接的葡萄糖残基的聚合物，支链在分支处通过α-（1→6）糖苷键与主链相连。 建模目的：建立老年痴呆(AD)小鼠模型,用于AD及其治疗药物的研究。 所需材料：NIH小鼠，蛋白定量(双缩脲法)测定试剂盒、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定试剂盒和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定试剂盒、D2半乳糖(生化试剂)、亚硝酸钠(分析纯) 建模方法：选用NIH小鼠,腹腔注射D2半乳糖120mg 和亚硝酸钠90mg ,每天1次,连续60d,制备老年痴呆动物模型。通过水迷宫试验,脑组织匀浆蛋白质含量、乙酰胆碱酯酶(AchE) 和超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定,脑组织病理切片HE染色和刚果红染色,比较老年痴呆模型小鼠和正常小鼠的差异。 建模步骤： 1、雌性NIH小鼠40只,20～24g, 每组20只,随机分为空白对照组和AD模型组。造模方法为:小鼠每日腹腔注射D2半乳糖120mg/kg和亚硝酸钠90mg/kg,连续60d;空白对照组腹腔注射等体积生理盐水。 2、水迷宫试验：自动记录水迷宫装置为80cm×50cm×20cm的茶色有机玻璃槽(中国医科院药物所研制),内设起点、终点(台阶)和多处盲端,水深9cm,水温24℃～27℃,记录小鼠从起始点放入至找到台阶的时间(寻找潜伏期),若超过120s则以120s计。 给药完毕后第1天,各组小鼠进行训练,使其找到台阶;第2～4天加长路程,记录各组小鼠的寻找潜伏期。 3、脑内相关指标的测定：行为学试验结束后,每组取10只 小鼠禁食12h,断头处死,取全脑(嗅脑除外),置玻璃匀浆器 中,加入预冷生理盐水制成10%(g/ml)脑匀浆,3000r/min离心10min,取上清液置冰浴中,测定蛋白含量和AchE、SOD活性,按试剂盒说明书所述步骤操作,取样量均为50ml 4、病理检查：各组余下小鼠腹腔注射戊巴比妥钠60mg/kg麻醉,仰卧固定于手术台上,剪开胸腔,暴露心脏,用生理盐 水和4%多聚甲醛进行心脏灌注固定,至四肢僵直为止,取全脑和 僵直：指某些神经末梢、神经肌肉接头病变引起的躯干、肢体等肌肉的僵直。 麻醉：是指应用药物或其他方法使病人的感觉暂时丧失，以达到无痛的目的，为手术治疗或其他医疗检查治疗提供良好条件。 * *