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细胞生物学的研究方法;;表一、几种介质的折射率;(二)荧光显微镜:;荧光显微镜的应用
定性、定位和定量的研究组织内的荧光标记物质。
对活细胞内分子的动态变化进行实时观察。 ; ;相差显微镜观察培养中的HeLa细胞;(四)暗视野显微镜通过散射光成像;(五)显微电影摄影技术记录细胞或细胞器的运动过程
原理:用显微电影摄影术或电视录像以一定时间间隔拍摄。
应用:准确记录细胞或细胞器的运动过程和速度。 ;(六)共聚焦激光扫描显微境 Laser confocal scanning microscope, LCSM;普通荧光显微镜(a)与激光共聚焦显微镜(b)的成像比较; 二、电子显微技术; ;透射电镜及其图像;(二)扫描电子显微镜SEM;扫描电镜及其图像; ;;;疟疾破坏的两个红细胞;显微镜; ; 细胞分离方法;(一)离心方法
利用细胞的密度特性可有效分离不同的细胞。
如血浆白细胞和红细胞的分离。
; ; ; ; 二、细胞培养;;2.细胞培养的主要方式是原代培养和传代培养
原代培养(primary culture):直接从体内获取的组织和细胞进行的首次培养。
传代培养(secondary culture):原代培养的细
胞经过增殖达到一定密度后,将细胞分散,从一个培养器以一定比例移到另一个或几个容器中的扩大培养。;3.来源于体内的细胞可在体外建系(细胞系)
细胞系(cell line):在培养的细胞中产生“不死”的
变异细胞,这种细胞可以无限繁殖、传代。
细胞系的来源
取材于肿瘤组织的原代培养细胞(Hela细胞系)
培养过程中发生转化的正常细胞; ;单克隆抗体技术
正常淋巴细胞(如小鼠脾细胞)具有分泌抗体的能力,但不能长期培养,瘤细胞(如骨髓瘤)可以在体外长期培养,但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术,获1984年诺贝尔奖。;第三节 细胞组分的分离;一、细胞裂解; ;; ; 本章重点; 细胞的概念与分子基础;爪蟾的细胞核移植实验,证明细胞核的全能性; ;大肠杆菌;三、真核细胞;1.细胞的形态:; ;人卵与精子;光镜下结构;;原核细胞与真核细胞的比较;;四、病毒;第二节 细胞的分子基础;细 胞;无机化合物;2.无机盐;;(一)核 酸;;;DNA???子中脱氧核苷酸的排列顺序。; DNA双螺旋结构模型;DNA是遗传物质,其功能是----储存,复制和传递遗传信息。; ;;(二)蛋白质;;蛋白质的四级结构;1)蛋白质的一级结构;2)蛋白质的二级结构;3)蛋白质的三级结构;4)蛋白质的四级结构;蛋白质的分子结构;生化遗传病;(2)结构域是大分子蛋白质的结构组成单元
组成一个结构域的氨基酸残基通常在40~350之间。
具有相同结构域的蛋白具有类似功能。
通常通过结构域去推断某些蛋白质的功能。;(3) 蛋白质功能的发挥与其构象的改变密切相关
如磷酸化与去磷酸化使蛋白质构象改变,影响功能发挥。;3 蛋白质的分类; 组成成分; ;推断的细胞起源与进化时间表;;1、从无机小分子形成有机小分子;2 从有机小分子形成生物大分子; ;3 从生物大分子物质组成多分子体系;4 多分子体系演变为原始生命;(二)原始细胞形成的关键;二 原核细胞向真核细胞的演化; ;三 单细胞生物向多细胞生物的进化;粘细菌的生活史; ;; 细胞膜与物质的
穿膜运输、信号转导; 细胞膜(cell memberane);第一节 细胞膜的化学组成和生物学特性;生物膜;(一)膜脂——构成细胞膜的基本骨架;1. 磷脂——构成膜脂的基本成分;磷脂酰乙醇胺;
;2. 胆固醇:;胆固醇分子散布在磷脂之间,极性的羟基头部紧靠磷脂的极性头部,甾环固定于靠近磷脂碳氢链的位置;提高膜的稳定性。;;唾液酸;;脂质体的用途:
1.用于膜功能的
研究
2.作为体内药物
和DNA的运输
载体,用于基
因转移或代谢
性疾病的治疗;膜蛋白占膜含量的40%-50% 。
膜蛋白的主要功能:
转运蛋白:转运分子进出细胞
受体蛋白:接受外界信号并传递到细胞内引起相应
的反应
连接蛋白:支撑连接细胞骨架成分和细胞间质成分
酶蛋白:发挥催化作用;2.内在膜蛋
白;1. 内在膜蛋白(intrinsic proteins);2. 外在膜蛋白(extrinsic proteins);3.脂锚定蛋白(lipid-linked protein);1、2内在蛋白(穿膜蛋白)
3、4脂锚定蛋白
5、6外在蛋白;;(一)细胞膜的不对称性(asymmetry);SM
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