肠球菌利奈唑胺耐药基因optrA荧光定量检测方法的建立.docx

2 肠球菌利奈唑胺耐药基因optrA荧光定量检测方法的建立 摘要：为猪源肠球菌对恶唑烷酮类药物耐药流行情况的评价提供可靠的检测手段，本论文对肠球菌耐药基因 optrA的检测方法进行研究。方法：本研究基于SYBR Green I，建立optrA基因的荧光定量PCR检测方法。(1)针对 optrA基因序列，设计6对特异性引物， 分别在荧光定量 PCR 仪中进行检测，根据溶解曲线特征峰的单一性，对所 设计的引物进行筛选，得到扩增效果最好的一对引物optrA1；(2) 试剂盒提取肠球菌基因组DNA，分别以基因组DNA 和菌液为模板，进行普通PCR扩增和荧光定量PCR检测。结果：DNA普通PCR的