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另外还应与血吸虫病、黑热病、钩端螺旋体病、回归热等发热疾病相鉴别。 实验室诊断 疟疾病例的实验室诊断包括: 1、?疟疾病原学诊断技术 (1)病原学诊断(显微镜血片检查) (2)病原免疫学诊断(快速免疫诊断试条) (3)病原基因检测(PCR) 2、疟疾抗体诊断技术 (IFA) 基因:是具有遗传效应的DNA片段。 实验室诊断 1.病原学诊断 镜检疟原虫:血检疟原虫迄今仍是确诊疟疾最可靠的方法。恶性疟原虫在周围血液中仅见环状体和配子体(不发热时一般查不到疟原虫),间日疟无论在发作期或间歇期均可见到原虫。因此,选择适当血检时机非常重要。总之,凡是疟疾,最终定能查到疟原虫,不存在没有疟原虫的疟疾。 实验室诊断 2.免疫学诊断: (1)循环抗原的检测:快速免疫诊断试条 a.快速免疫诊断试条的应用范围:与显微镜检查疟原虫方法相似,主要用于疟疾病人的临床实验室诊断及居民带虫调查。 b.快速免疫诊断试条的优、缺点 :优点是方便、快速、简单、不需要仪器设备和有经验的检验人员。缺点是价格偏高,检测敏感度常不如显微镜厚血膜检查。 抗原:是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。抗原的基本特性有两种:一是诱导免疫应答的能力,也就是免疫原性;二是与免疫应答的产物发生反应,也就是抗原性。 实验室诊断 (2)循环抗体的检测:疟疾抗体诊断技术(IFA) a.间接荧光抗体检测疟疾抗体的意义 间接荧光抗体检测是疟疾血清流行病学研究的主要技术之一;主要研究人群的疟疾抗体水平及其变化,以及这些变化与疟疾传播、防治措施之间的关系。 b.间接荧光抗体试验优、缺点: 优点是结果可以通过个体或人群的特异性抗体水平的检测,了解特定人群或地区的疟疾流行强度,适合于大样本的检测。 缺点是需要荧光显微镜,荧光结果判定存在一定主观因素。 样本:以某方式按预先规定的概率从总体中随机抽取的足够数量的能够反映总体分布特征的一部分观察对象的某种指标值的集合。 实验室诊断 c.IFAT在疟疾血清流行病学中的应用 测定和比较不同疟区疟疾的流行水平或传播强度; 了解和比较不同人群近阶段感染疟疾的情况; 评价防治措施的效果; d.原理:用已知抗原检测未知抗体。 抗原:是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。抗原的基本特性有两种:一是诱导免疫应答的能力,也就是免疫原性;二是与免疫应答的产物发生反应,也就是抗原性。 实验室诊断 3.分子生物学技术(基因诊断):PCR和DNA探针已应用与疟疾的诊断 疟原虫基因检测(PCR) (1)疟原虫基因检测技术与常规的疟原虫显微镜血片检查和新发展的疟疾快速免疫诊断试条相比,疟原虫基因检测技术有其特殊的技术特点。 ①具有高度的检测敏感性:疟原虫基因检测敏感性显著高于疟原虫显微镜血片检查和快速免疫诊断试条。 ②具有高度的检测特异性:疟原虫基因检测特异性也显著高于疟原虫显微镜血片检查和快速免疫诊断试条。 ③需要较高的实验条件和技术:疟原虫基因检测需要符合标准的实验室,专门的PCR仪和有经验的专业技术人员。 基因:是具有遗传效应的DNA片段。 生物学:研究生命的科学,它既研究各种生命活动的现象和本质,探讨生物发生和发展的规律,又研究生物之间以及生物与环境之间的相互关系。 实验室诊断 (2)与常规的疟原虫显微镜血片检查和新发展的疟疾快速免疫诊断试条检测不同,疟原虫基因检测技术在疟疾监测中主要用于某些特殊目的要求的检测。 特殊病例样本的检测: a.大批量低原虫密度样本的检测(居民带虫调查); b.混合感染样本的检测(混合流行区疟疾病例的确诊) ?特殊目的疟疾病例的检测 a.抗药性恶性疟的检测; b. 疟疾流行区传染源的追踪调查 样本:以某方式按预先规定的概率从总体中随机抽取的足够数量的能够反映总体分布特征的一部分观察对象的某种指标值的集合。 疟疾病例分类 参照国家《疟疾诊断标准及处理原则》(GB15989),可将临床疟疾病例分为3类: 1、临床诊断病例:患者有发热症状(体温超过37.5℃)且热型具有典型的疟疾周期性发作特征; 2、镜检确诊病例:患者有发热症状(体温超过37.5℃),病原学检查(显微镜血涂片检查)结果阳性; 3、试治有效病例:患者有发热症状(体温超过37.5℃),采用抗疟药试治并证实有效。 另外还有疑似疟疾的诊断病例: (具备1、2与3或4) (1)患者有原因不明发热症状(体温超过37.5℃); (2)有生活或去过疫区(或输血)史; (3)未能进行实验室病
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