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核酸结构功能与核苷酸代谢 (2).ppt

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四、小分子RNA 除了上述3种主要的RNA外,细胞内还存在多种小分子RNA,这些RNA种类繁多,功能多样,由此产生了RNA组学(RNomics)概念,即研究细胞内所有小分子RNA的种类、结构和功能。 小分子RNA主要有:核内小RNA、核仁小RNA、胞质小RNA、催化性小RNA即核酶。(ribozyme)、小干扰RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)。这些小分子RNA在RNA的转录后加工、转运,基因表达调控等方面起非常重要的作用。 第三十页,共七十五页,2022年,8月28日 补句号 核酶是具有自我催化功能的小分子RNA。 核酶的发现和深入研究不仅改变了长期以来人们认为“酶的化学本质是蛋白质”的传统概念,而且推动了人们对生命活动多样性的理解。 第三十一页,共七十五页,2022年,8月28日 增加“是” 第四节 核酸的理化性质 一、核酸的一般性质 核酸是两性电解质,它既含有酸性的磷酸基,又含有碱性的碱基,故可在电场中泳动。 通常因磷酸基的酸性较强,核酸常显示酸性 在碱性条件下,RNA不稳定,可在室温下水解,利用这个性质可以测定RNA的碱基组成,也可清除DNA溶液中混杂的RNA。 核酸是生物大分子,在溶液中的粘度很高。 第三十二页,共七十五页,2022年,8月28日 黏? 不必改的。 二、核酸的紫外吸收  核酸在260nm波长处有最大吸收峰,这是因为核酸分子中嘌呤碱和嘧啶碱都含有共轭双键,利用这一特性可进行核酸的定量分析。 第三十三页,共七十五页,2022年,8月28日 三、核酸的变性、复性与杂交 (一)变性 :是指在某些理化因素的作用下, DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,双螺旋被解开,形成单链的过程。 变性过程不伴有共价键的断裂,DNA一级结构没有被破坏。 引起核酸变性的因素很多,如加热、化学处理(有机溶剂、酸、碱、尿素、酰胺等)。 第三十四页,共七十五页,2022年,8月28日 加句号 DNA的热变性在一个很狭窄的温度范围内进行,这个温度范围的中点叫做解链温度,用Tm值表示。 Tm是指有DNA双链解开50%时的环境温度,它与DNA的碱基组成,DNA分子的长度、溶液离子强度等因素有关。 DNA变性时,原来位于双螺旋内部的碱基暴露,造成260nm处的紫外吸收值增高,这种现象称为增色效应(hyperchromic effect)。 第三十五页,共七十五页,2022年,8月28日 (二)复性 :DNA的变性是可逆的,当变性后温度再缓慢下降,解开的两条链又可重新恢复天然的双螺旋构象,这一过程叫做复性或退火。 如果两条链的碱基完全互补,通过碱基配对就有机会达到天然DNA的状态,DNA变性引起的性质改变也得以恢复。 第三十六页,共七十五页,2022年,8月28日 分子杂交技术是以核酸的变性与复性为基础建立起来的一种技术。 不仅同源的DNA单链之间可以进行杂交,形成双链。 而且不同来源的DNA、DNA与RNA,以及RNA之间也可杂交,只要这些核酸分子含有可以形成碱基互补配对的序列。 通过杂交反应就可以确定两种不同核酸之间的同源性有多大。如果同源性越高(即碱基顺序相同的程度越大),杂交的程度就越大。 (三)核酸的分子杂交 第三十七页,共七十五页,2022年,8月28日 标题与上页字号不一致 第五节 核苷酸代谢 核苷酸是核酸(DNA和RNA)的基本组成单位 体内核苷酸主要生理功用是作为原料参与DNA、RNA生物大分子的合成 核苷酸还参与多种物质代谢过程: ①ATP是可直接利用的能源分子 ②作为活化中间物的载体,如UDP携带糖基参加糖原、糖蛋白的合成; ③核苷酸作为多种辅酶(NAD+、FAD、HSCoA等)的重要组成成分; ④环核苷酸cAMP和cGMP是激素信号传递过程的信息分子。 第三十八页,共七十五页,2022年,8月28日 圈码前的小方块项目符号应删除,已改 核酸的消化与吸收 食物核蛋白 蛋白质 核酸(RNA及DNA) 胃酸 核苷酸 胰核酸酶 核苷 磷酸 胰、肠核苷酸酶 碱基 戊糖 核苷酶 第三十九页,共七十五页,2022年,8月28日 一、 嘌呤核苷酸代谢 (一)嘌呤核苷酸的合成代谢 哺乳类细胞嘌呤核苷酸的合成有2条途径。 主要合成途径是用简单小分子磷酸核糖、氨基酸、一碳单位及CO2等为原料,经过多步酶促反应,进行嘌呤核苷酸的合成,称为从头合成途径(de novo synthesis)。 以细胞已有的嘌呤或嘌呤核苷为前体,经过酶促反应直接合成嘌呤核苷酸,称为补救合成途径(salvage pathway)。 一般来说,体内多数组织主要是肝组织通过从头合成途径合成嘌呤核苷酸。 第四十页,共七十五页,2022年,8月28日 2? 1. 嘌呤核苷酸的从头合成 原料: 5-磷酸核糖、谷氨酰胺、一碳单位、

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