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羊巴氏杆菌病防治技术规范 1 范围 本文件规定了甘肃省羊巴氏杆菌病的诊断、预防、治疗的技术要求。 本文件适用于甘肃省境内从事羊的饲养、经营，以及从事动物防治活动的单位和个人。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 27530 羊巴氏杆菌病诊断技术 《中华人民共和国兽药典》 （二〇二〇版） 《动物疫情报告管理办法》 （农业部农牧发[1999]18号） 《无公害农产品兽药使用准则》(NY/T 5030-2016) 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 羊巴氏杆菌病 是由多杀性巴氏杆菌引起羊的一种急性、全身性传染病。我国将其列为二类动物疫病。 4 诊断 4. 1 流行特点 4. 1. 1 发病年龄 在绵羊中多发于幼龄羊和羔羊，山羊不易感染。 4. 1. 2 传染源 病羊和健康带菌羊。 4. 1. 3 潜伏期 潜伏期有时长有时短。 4. 1. 4 传播途径 病羊和健康带菌羊是传染源；病原随分泌物和排泄物排出体外，经呼吸道、消化道及损伤的皮肤而 感染健康羊。受寒、长途运输、饲养管理不当、抵抗力降低时，可发生自体内源性感染。 4. 1. 5 发病季节 1 DB 62/TXXXX-2016 本病一般无明显季节性，但以冷热交替、气候剧变、闷热、潮湿、多雨的时期多发。多呈散发性， 也可呈地方流行性。 4. 1. 6 病死率 一般情况下，病死率不超过30 ％。 4.2 临床症状 4. 2. 1 最急性型 多见于哺乳羔羊，往往突然发病，出现寒颤、虚弱、呼吸困难等症状，于数分钟至数小时内死亡。 4. 2. 2 急性型 病羊精神沉郁，体温升高到41℃～42℃；咳嗽，眼红肿，眼、鼻流黏液，甚至鼻孔出血；初期便秘， 后期腹泻，有时粪便全部变成血水；病期2 d～5 d，严重腹泻后虚脱而死。 4. 2. 3 慢性型 主要见于成年羊，病程可达30 d左右；病羊消瘦，食欲减退，流黏脓性鼻液；颈胸部水肿，咳嗽气 喘，呼吸困难，腹泻。 4. 3 病理变化 一般在皮下有炎性渗出和小出血点，胸腔内积有黄色渗出性浆液；咽喉、气管黏膜炎性肿胀；肺淤 血，有小出血点，偶见有黄豆至胡桃大的化脓灶；胃肠道有出血性炎症；脾脏有时可见小出血点，但不 肿大。病期较长者死后，尸体消瘦，皮下胶样浸润，常有纤维素性胸膜肺炎，肝脏有坏死灶。 4. 4 实验室诊断 4. 4.1 病原学诊断 4. 4. 1. 1 病料采集 对病死羊无菌采集体腔渗出液、心脏、脾脏、肝脏、肺脏、淋巴结等新鲜病料。对于急性型和慢性 型病羊，无菌采集局部水肿液、渗出物、脓汁、肿胀的淋巴结或其他病变组织等。 4. 4. 1. 2 染色镜检 将病料直接作涂片或触片，可采用革兰氏、瑞特氏、姬姆萨或美蓝染色，置油镜下暗视野观察。如 见有大量革兰氏阴性、典型两极着色的短杆菌或球杆菌，结合流行特点、临床症状和病理变化，可作出 初步诊断。 4. 4 1. 3 病原特征 多杀性巴氏杆菌呈球杆状或短杆状，两端钝圆，长0.6 μm～2.5 μm，宽0.25 μm～0.6 μm。常单个存 在，有时成双排列，革兰氏染色阴性。病料涂片用瑞特氏、姬姆萨或美蓝染色后，镜检可见典型的两极 着色、无鞭毛、无芽孢的杆菌。 4. 4. 1. 4 细菌分离培养 按照GB/T 27530执行。 4. 4. 2 血清学诊断 按照GB/T 27530执行。 4. 4. 3 动物接种试验 取病料少许用无菌生理盐水制成1:5～1:10的悬液，接种于健康小白鼠的肌肉或皮下，剂量为每只 0.2 mL～0.5 mL 。如于24 h～48 h死亡，采集血液、肝脏、脾脏作涂片或触片染色镜检，可见大量巴氏 杆菌即可确诊。 2 4. 4. 4 PCR鉴定 4. 4.4.1 引物的设计合成 参照文献合成多杀性巴氏杆菌特异性基因KMT1及荚膜血清特异性基因capA 、capB 、capD 、capE、 capF序列引物，同时参照文献合成细菌16S