质粒介导细菌耐药的机制研究.pptx

质粒介导细菌耐药的机制研究菌株背景资料质粒介导细菌耐药机制的研究针对的研究对象产碳青霉烯酶的革兰氏阴性菌，且碳青霉烯酶基因由质粒携带。多药耐药、广泛耐药、泛耐药的革兰氏阴性菌，且主要耐药基因由质粒携带。拟回答的科学问题质粒上有哪些耐药基因？质粒是否具有接合转移能力？质粒是否介导相应的耐药性？质粒全序和精细结构如何？与同源质粒的结构异同如何？质粒上有哪些移动元件（插入序列、整合子、转座子等）？有哪些耐药基因座位？耐药基因的启动子结构如何？耐药基因表达特征如何？ 插入序列整合子Tn3家族转座子一株产NDM-1的产气肠杆菌NDM基因座位的多态性产NDM超级耐药菌的全球播散(2014年）病人临床背景资料患者男性，86岁，因肺炎入住西安市某三甲医院老年病科，入院前胸部X光片提示双下肺感染，痰培养院前和入院后均为产气肠杆菌，静脉应用左氧氟沙星抗感染治疗，治愈出院。3-SP分离于痰标本，生化、质谱和16S rRNA基因鉴定为产气肠杆菌。MIC结果对2种碳青霉烯类药物耐药，同时对三代头孢菌素类耐药，怀疑为产碳青霉烯酶细菌。实验菌株菌 株特 征3-SP野生株，含有NDM-1质粒3-SP-EC600接合子：3-SP的NDM-1质粒，接合转移入EC6003-SP-DH10B电转化子：3-SP的NDM-1质粒，电转化如入DH10BEC600接合转移受体菌DH10B电转化受体菌ATCC-BAA-2146携带NDM-1的国际标准株16S rDNA测序质谱鉴定物种标示基因的扩增耐药基因部分片段的扩增与测序耐药基因全长的扩增与测序耐药基因筛查鉴定质粒个数与大小碳青霉烯酶酶活检测最小抑菌浓度（MIC）测定CategoryAntibioticsMIC/antimicrobial susceptibility3-SP3-SP-EC6003-SP-DH10BEC600DH10BPenicillinAmpicillin=32/R=32/R=32/R16/I=2/SAmpicillin/sulbactam=32/R=32/R=32/R8/S=2/SPiperacillin=128/R=128/R=128/R=4/S=4/SPiperacillin/tazobactam=128/R64/R64/R=4/S=4/SMonobactamAztreonam=64/R=64/R=64/R=1/S=1/SCephalosporinCefazolin=64/R=64/R=64/R=4/S=4/SCefuroxime sodium=64/R=64/R=64/R16/I4/SCefuroxime axetil=64/R=64/R=64/R16/I4/SCefotetan=64/R=64/R32/R=4/S=4/SCeftriaxone=64/R=64/R=64/R=1/S=1/SCeftazidime=64/R=64/R=64/R=1/S=1/SCarbapenemImipenem8/R=16/R=16/R=1/S=1/SMeropenem8/R4/R8/R=0.25/S=0.25/SFluoroquinoloneCiprofloxacin2/I=0.25/S=0.25/S=0.25/S=0.25/SLevofloxacin2/S0.5/S=0.25/S1/S=0.25/SFuraneMacrodantin64/I=16/S=16/S=16/S=16/SAminoglycosideAmikacin=2/S=2/S=2/S=2/S=2/SGentamicin=1/S=1/S=1/S=1/S=1/STobramycin=1/S=1/S=1/S=1/S=1/SSulfanilamideTrimethoprim/sulfamethoxazole=20/S=20/S=20/S=20/S=20/S耐药质粒p3SP-NDM全序测定所有pNDM-BJ01-like plasmids比较基因组blaNDM-1基因簇比对分析一株产KPC-2和NDM-1的广泛耐药弗氏枸橼酸杆菌菌株临床背景资料弗氏枸橼酸杆菌112298分离于广州市某三甲医院重症医学科一名56岁男性感染性休克患者的中段尿标本。感染源考虑为胆囊及左前臂软组织感染处。前期给予替考拉宁加美罗培南抗感染治疗，效果不好。药敏结果提示112298对几乎所有β内酰胺类抗生素均耐药。改用丁胺卡那+大扶康抗感染治疗后，体温正常，感染指标下降，治疗效果有效。由于患者家属要求出院到外院治疗，遂予以签字出院，并嘱其尽快到外院治疗。 实验菌株菌株名称菌株信息耐药基因112298野生株KPC-2, CTX-M-14, OXA-1NDM-1, and SHVKPC-TOP10电转子KPC-2, CTX-M-14, and OXA-1112298-ND