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会计学;第1页/共11页;用品:
培养肺癌细胞(95D) 荧光染料Hoechst33258 PBS (无Ca++ 、 Mg++),PH 7.2 4%福尔马林、PBS配 荧光显微镜;;正常细胞 凋亡细胞;第5页/共11页;克隆形成率计数;第7页/共11页; Giemas染色法;用品:
原液的配置:
Giemsa 0.25g
甘油 2 5ml
甲醇 25ml
缓冲液的配置:Ⅰ 1/15mol KH2PO4
Ⅱ 1/15mol Na2HPO4
Ⅰ:Ⅱ=4:6 pH=6.9
染色液配置:1份原液+9份缓冲液
;步骤:
1.单层培养细胞,PBS洗二次;
2.甲醇固定 10分钟;
3. 用滴管将配好的染色液布满整孔;
4.染10分钟,用自来水冲去染液;
5.显微镜计数,统计克隆形成率。
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