荧光分析技术与应用.pptx

会计学;荧光分析法（Fluorometry);一、概述;一、概述;一、概述;荧光分析法（Fluorometry);二、基本原理;二、基本原理;（2）荧光的产生;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理; 迟滞荧光:处于激发三线态的某些分子还可以通过又一次 体系间跨越回到激发单线态,继而再发射荧光 回到基态。 在室温下，磷光一般不易呈现，若要测磷光应在低 温下，仪器应有低温设施。 2、激发光谱与荧光光谱： 光源 单色器Ⅰ 样品池 It F 单色器Ⅱ 检测器 记录;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;二、基本原理;3、分子结构与荧光的关系; b.荧光效率（fluorescence efficiency)：它又称为荧光量子产率（fluorescence quantum yield)，就是指激发态分子发射荧光的光子数与基态分子吸收激发光的光子数之比，常用φf表示。;3、分子结构与荧光的关系;b.分子结构与荧光的关系;★.分子的刚性和共平面。; 主要是b由于空间位阻效应使分子发生扭曲，两个苯环不能共平面，从而使荧光大大减弱。;反式强荧光 顺式无荧光;★.取代基的作用。; ②.吸电子基团会妨碍分子的电子共轭性，使荧光减弱甚至熄灭。; ③.对电子共轭体系作用较小的取代基对荧光的影响不明显。;4、影响荧光强度的外部因素;4、影响荧光强度的外部因素;c. pH的影响;d.荧光熄灭（fluorescence quenching);e.散射光的干扰;e.散射光的干扰;荧光分析法（Fluorometry);1、荧光强度与荧光物质浓度的关系;当EcL≤0.05时，经泰勒级数展开得：;2、定量分析方法;（2）比例法;荧光分析法（Fluorometry);1、荧光仪器简介;四、荧光分析技术及应用;四、荧光分析技术及应用;2、荧光分析新技术;四、荧光分析技术及应用;四、荧光分析技术及应用;荧光分析法（Fluorometry);1、掌握去活化的几条途径是什么？有何区别？熟悉三重态、单重态概念。 2、掌握荧光、磷光定义, 成因及它们的区别。 3、掌握φf概念。 4、熟悉激发光谱、荧光光谱定义及荧光光谱的特点。 5、知道如何找λex、λem? 6、了解Raman光、Reyleigh光定义及影响。 7、分子吸收光谱与荧光光谱区别（一般了解）。 8、 F=KC使用范围Ecl≤0.05（了解）。 9、了解影响荧光强度的因素。 10、仪器部件、两种仪器区别（熟悉或了解）。 作业：复习基本理论;六、复习思考题;六、复习思考题