《药品生物检定技术》全套PPT课件.pptx

项目一 注射用链霉素的生物检定;《中国药典》 ;注射用硫酸链霉素质量标准【检查】项下其他 应符合 注射剂项下有关的各项规定（通则0102）【含量测定】照硫酸链霉素项下的方法测定，即得。;通则0102注射剂;硫酸链霉素质量标准;要完成该品种的无菌检查，除了需要操作场所，玻璃用具，培养基等的准备，还需要人员知识储备的准备……;;检阅《中国药典》（2015）第四部，1101 无菌检查法系用于检测药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。;无菌检查标准操作规程（Standard Operation Practice, SOP） SOP的内容一般包括：表头部分和正文部分。;锥形瓶（250ml）6个，锥形瓶（500ml）2个， 镊子1把，清洗、烘干，包扎，置于灭菌筐内； 薄膜过滤器1套, 清洗、烘干，安装滤膜,包扎，灭菌。 滤膜5张，置于小烧杯内，包扎灭菌。 镊子1把;配制培养基和缓冲液，灭菌;称量硫乙醇酸盐流体培养基 , 加纯化水 ml，于 ℃灭菌 min； 称量胰酪大豆胨液体培养基培养基 ,加纯化水 ml于 ℃灭菌 min。;分装培养基;硫乙醇酸盐流体培养基;胰酪大豆胨液体培养基 ;0.1%蛋白胨水溶液;实验操作前的准备 严格无菌操作 将供试品及所有已灭菌用品等移至无菌室内。每次实验所用物品必须事先计划，准备足够用量，避免操作中出入操作间。编号后将全部外包装（牛皮纸、布）取掉。 开启无菌室紫外杀菌灯和空气净化装置，不少于30分钟。 操作人员用肥皂洗手，关闭紫外杀菌灯，进入缓冲间，换工作鞋。再用0.1％ 苯扎溴铵溶液或其他消毒液洗手或用乙醇棉擦手，穿戴无菌衣、帽、口罩。 操作前先用乙醇棉球擦手，再用乙醇棉球擦拭供试品瓶、开口处周围，待干后用灭菌的手术镊或剪将供试品启封。;阳性对照 以金黄色葡萄球菌【CMCC(B)26003】为对照菌 菌液的制备 接种金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养中，30-35培养18-24小时。 用无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。 菌悬液在室温，2小时内使用。若保存在2-8冰箱可在24小时内使用。;金黄色葡萄球菌菌悬液的制备：;阴性对照 供试品无菌检查时，应取相应溶剂和稀释液同法操作，作为阴性对照。 阴性对照不得有菌生长。;供试品的处理及接种培养基 用适宜的消毒液对供试品容器表面进行消毒。;薄膜过滤法 薄膜过滤法是各国药典和《中国药典》规定的无菌检测的方法，适用于任何类型药品的无菌检测， 《中国药典》（2015年版）规定：若供试品性状允许，应优先采用薄膜过滤法。 薄膜过滤法可以采用封闭式薄膜过滤器或传统开放式薄膜过滤器，但应优先选用封闭式薄膜过滤器。 ;滤膜与滤器;选择过滤器 薄膜过滤法应优先选用封闭式薄膜过滤器，也可使用开放式薄膜过滤器。 过滤器及滤膜使用前采用高压蒸汽灭菌。;如供试品有抑菌活性，需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量一般为100ml，且总冲洗量不得超过1000ml;水溶性固体供试品;水溶性供试品;1;供试品100ml稀释液溶解，抽滤;用冲洗液冲洗滤膜，抽滤;1;;;阳性、阴性对照结果判定： 阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长，判定试验有效。否则，试验无效。 当满足下列至少一个条件时，判检测结果无效： ①无菌检查试验所用的设备以及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求； ②回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素； ③阴性对照管有菌生长； ④供试品容器中生长的微生物经检定后，确证微生物生长是因无菌试验中所使用的物品和(或)无菌操作技术不当引起的。;结果判断;薄膜过滤法;无菌检测用的滤膜孔径不能大于0.45μm，滤膜直径为50mm。; 操作过程;请说出需要灭菌的用具; 无菌检查 ;接入供试液，抽滤;用冲洗液冲洗滤膜，抽滤;1;;2 供试品的接入;3 薄膜过滤法操作; 培养及观察 ;;结果判断;当符合下列至少一个条件时可判实验结果无效：;;背景信息 我单位生产的批号次的葡萄糖注射液需要进行细菌内毒素检查。检验组长将此部分工作任务下达给你。;;无菌检查标准操作规程（Standard Operation Practice, SOP） SOP的内容一般包括：表头部分和正文部分。;1、鲎试剂 ;细菌内毒素工作标准品 用于试验中鲎试剂灵敏度复核、干扰试验及各种阳性照。 3、细菌内毒素检查用水BET 对