光学显微镜的结构与使用方法.doc

光学显微镜的结构与使用方法 【目的要求】 1、熟习光学显微镜的主要结构及其性能。 2、掌握低倍镜及高倍镜的使用方法。 3、初步掌握油镜的使用方法。 4、认识光学显微镜的保护方法。 【实验原理】 光学显微镜(lightmicroscope)是生物科学和医学研究领域常用的仪器，它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其余相关学科的教课研究工作中有着极为宽泛的用途，是研究人体及其余生物机体组织和细胞结构强有力的工具。 光学显微镜简称光镜，是利用光芒照明使细小物体形成放大影像的仪器。当前使用的光镜种类众多，外形和结构差异较大，有些种类的光镜有其特别的用途，如暗视线显微镜、荧光显微镜、相差显微镜，倒置显微镜等，但其基本的结构和工作原理是相像的。一台一般光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成，而光学系统则主要包含光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等零件。 光镜是怎样使细小物体放大的呢？物镜和目镜的结构固然比较复杂，但它们的作用都 是相当于一个凸面镜，因为被检标本是放在物镜下方的1～2倍焦距之间的，上方形成一倒立的放大实相，该实相正好位于目镜的下焦点（焦平面）以内，目镜进一步将它放大成一 个虚像，经过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处，在视网膜上形成一个直立的实像。显微镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相符合的，该虚像看起来仿佛在离眼睛 25cm处。 分辨力是光镜的主要性能指示。所谓分辨力(resolvingpower)也称为辨率或分辨本 领，是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的 能力，即分辨出标本上互相靠近的两点间的最小距离的能力。据测定，人眼的分辨力约为 μm。显微镜的分辨力由物镜的分辨力决定，物镜的分辨力就是显微镜的分辨力，而目镜与显微镜的分辨力没关。光镜的分辨力（R）（R值越小，分辨率越高）能够下式计算： 这里n为聚光镜与物镜之间介质的折射率（空气为1、油为1.5）；?为标本对物镜镜口张角的半角，sin的最大值为1；?为照明光源的波长（白光约为0.5m）。放大率或放大倍数是光镜性能的另一重要参数，一台显微镜的总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 一、光学显微镜的基本结构及功能 （一）机械部分 1、镜筒：为安装在光镜最上方或镜臂前面的圆筒状结构，其上端装有目镜，下端与物 镜变换器相连。依据镜筒的数量，光镜可分为单筒式或双筒式两类。单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种。而双筒式光镜的镜筒均为倾斜的。镜筒直立式光镜的目镜与物镜的中心线互成45度角，在其镜筒中装有能使光芒折转45度的棱镜。 2、物镜变换器：又称物镜变换盘。是安装在镜筒下方的一圆盘状结构，能够按顺时针或反时针方向自由旋转。其上平均散布有3～4个圆孔，用以装载不一样放大倍数的物镜。转动物镜变换盘可使不一样的物镜抵达工作地点（即与光路合轴）。使用时注意凭手感使所需物 镜正确到位。 3、镜臂：为支持镜筒和镜台的曲折状结构，是取用显微镜时握拿的部位。镜筒直立式 光镜在镜臂与其下方的镜柱之间有一倾斜关节，可使镜筒向后倾斜必定角度以方便察看， 但使用时倾斜角度不该超出45度，不然显微镜则因为重心偏移简单翻倒。在使用暂时装片刻，千万不要倾斜镜臂，免得液体或染液流出，污染显微镜。 4、调焦器：也称调焦螺旋，为调理焦距的装置，位于镜臂的上端（镜筒直立式光镜）或下端（镜筒倾斜式光镜），分粗调螺旋（大螺旋）和细调螺旋（小螺旋）两种。粗调螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的起落，能快速调理好焦距使物像体此刻视线中，适于低倍镜察看时的调焦。而细调螺旋只好使镜筒或载物台迟缓或较小幅度的起落（升或 降的距离不易被肉眼察看到），合用于高倍镜和油镜的聚焦或察看标本的不一样层次，一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调焦螺旋，精美调理焦距。 有些种类的光镜，粗调螺旋和细调螺旋重合在一同，安装在镜柱的双侧。左右边粗调螺旋的内侧有一窄环，称为粗调松紧调理轮，其功能是调理粗调螺旋的松紧度（向外转偏松，向内转偏紧）。此外，在左边粗调螺旋的内侧有一粗调限位环凸柄，当用粗调螺旋调准焦距后向上推紧该柄，可使粗调螺旋限位，此时镜台不可以持续上涨但细调旋仍可调理。 5、载物台：也称镜台，是位于物镜变换器下方的方形平台，是搁置被察看的玻片标本 的地方。平台的中央有一圆孔，称为通光孔，来自下方光芒经此孔照耀到标本上。 6、镜柱：为镜臂与镜座相连的短柱。 7、镜座：位于显微镜最底部的结构，为整个显微镜的基座，用于支持和稳固镜体。有 的显微镜在镜座内装有照明光源等结构。 （二）光学系统部分 光镜的光学系统主要包含物镜、目镜和照明装置（反光镜、聚光器和光圈等）。 1、目镜：又称接目镜，安装在镜筒的上端，起着将物镜所放大的物像进一步放大的作 用。每个目镜一般由两个透镜构成，在上下两