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1950~1952年Wilkins及Franklin用X射线衍射技术测定了DNA纤维的结构,衍射图像表明DNA分子均有典型的螺旋结构,并且有两条以上多核苷酸链组成。 1953年 Watson和Crick提出了DNA双螺旋模型。这个模型表明DNA具有自身互补的结构。根据碱基配对原理DNA中储存的遗传信息可以精确地进行复制。 获得了1962年的诺贝尔奖。 * DNA复制机理的认识 1956,Kornberg discovered DNA polymerase. 1958,Meselson and Stahl used density gradient centrifugation to demonstrate that the two parental strands of DNA unwind during replication and combine with newly synthesized daughter strands (DNA Replication Mechanism ) 1968年Okazaki(冈畸)-提出DNA不连续复制模型; 1972年证实了DNA复制开始需要RNA作为引物 * DNA双螺旋模型已经预示出DNA复制的规则。 1956年 Kornberg在大肠杆菌的无细胞提取液中实现了DNA的合成,证明DNA的复制是一个非常复杂的过程,包含着许多种酶的参与。获得了1959年的诺贝尔奖。 1958年 Meselson和Stahl用15N同位素标记及密度梯度超速离心证明DNA复制是一种半保留复制。 * 遗传密码的破译 和蛋白质合成 Robert W. Holley阐明了酵母丙氨酸tRNA的核苷酸序列,并证实所有tRNA具有结构上的相似性 Har Gobind Khorana第一个合成了核酸分子,并且人工复制了酵母基因。 Marshall W. Nirenberg破译了DNA遗传密码 The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1968 for their interpretation of the genetic code and its function in protein synthesis * 中心法则(Central Dogma)的建立 1954,Francis Crick put forward the idea of information flow in the biosphere which was called the central dogma of molecular biology. Temin and Baltimore independently reported the discovery of reverse transcriptase (反转录酶)in RNA viruses. The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1975 转录 翻译 * 40年代确定了遗传信息的携带者,即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质,解决了遗传的物质基础问题; 50年代提示了DNA分子的双螺旋结构模型和半 保留复制机制,解决了基因的自我复制和世代交替问题; 50年代末至60年代,相继提出了中心法则和操纵子学说,成功地破译了遗传密码,充分认识了遗传信息的流动和表达。 * 重组DNA技术的建立和发展阶段 * 重组DNA技术的建立和发展 1972, P. Berg*, USA, lays the foundation of recombinant-DNA technology. (*1980) for his fundamental studies of the biochemistry of nucleic acids, with particular regard to recombinant-DNA The Nobel Prize in Chemistry 1980 (1/2) 重组DNA技术发展史上的重大事件 * Plasmid isolated 1 Bacterium 细菌 Bacterial chromosome 细菌染色体 Plasmid 2 DNA isolated Cell containing gene of interest 含欲选择某基因的细胞 DNA Gene of interest 3 Gene inserted into plasmid Recombinant DNA (plasmid) 4 Plasmid put into bacterial cell Recombinant bacterium 5

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