菌落总数与大肠菌群数测定详解演示文稿.pptVIP

媒染 当前30页，总共37页。 脱色 当前31页，总共37页。 复染 当前32页，总共37页。 革兰氏染色阴性 革兰氏染色阳性 革兰染色法 当前33页，总共37页。 复发酵 器材与试剂 培养24小时后的伊红美兰平板、酒精灯、接种环、复发酵管 当前34页，总共37页。 大肠菌群数测定 实验步骤 3.复发酵 （1）选取鉴定为无芽孢G-杆菌的菌落1-3个 （2）接种至10ml乳糖蛋白胨培养液 （3）培养：37℃，24h （4）观察指标：产酸，产气 当前35页，总共37页。 液体接种 当前36页，总共37页。 菌落总数与大肠菌群数测定详解演示文稿 当前1页，总共37页。 优选菌落总数与大肠菌群数测定 当前2页，总共37页。 菌落总数测定 掌握菌落总数测定方法 实验原理 不同稀释度的样品，营养琼脂培养基，36 ℃，48h（水产品30 ℃，72h ），菌落数 当前3页，总共37页。 菌落总数测定 器材与试剂： 样品，无菌生理盐水，平板计数琼脂培养基，1ml吸管，培养皿 当前4页，总共37页。 菌落总数测定 当前5页，总共37页。 倾注培养 当前6页，总共37页。 培养结果 当前7页，总共37页。 菌落总数测定 实验步骤 5.菌落计数： 肉眼观察，可用放大镜，可标记 必要时分区计数，菌落成片者作废 计算方法 某稀释度的菌落数：两平板菌落数取平均值 选择菌落数在30-300之间的稀释度 （1）仅有一个稀释度在此范围： 菌落数×稀释倍数 当前8页，总共37页。 菌落总数测定 计算方法： （2）有两个稀释度在30-300之间 菌落数之比2，选较小值 菌落数之比2，取平均值 （3）所有稀释度均300 取稀释倍数最大者 （4）所有稀释度均30 取稀释倍数最小者 （5）没有任何稀释度在30-300之间 选最接近该范围者 结果单位：CFU/ml（g） 当前9页，总共37页。 菌落总数测定 注意事项： 1.无菌操作 2.标记 3.何时更换吸管 4.吸吹混匀 5.琼脂培养基保温 6.安全常识 当前10页，总共37页。 大肠菌群数测定 实验目的 实验原理 36 ℃，48h，产气（小倒管） 三步法：初发酵、复发酵 器材与试剂 样品、无菌生理盐水、LST肉汤，BGLB肉汤 1ml吸管、10ml吸管、试管、小倒管 当前11页，总共37页。 初发酵 器材与试剂 样品、225ml无菌生理盐水、9ml无菌生理盐水、双料LST肉汤，单料LST肉汤，10ml吸管、1ml吸管、吸球 当前12页，总共37页。 大肠菌群数测定 实验步骤： 1.初发酵 当前13页，总共37页。 当前14页，总共37页。 当前15页，总共37页。 吸取样品方法 当前16页，总共37页。 加注样品 当前17页，总共37页。 初发酵结果 右边为阳性结果，小倒管内有气体产生。 当前18页，总共37页。 实验步骤 3.复发酵 （1）选取产气试管 （2）接种至10mlBGLB肉汤中 （3）培养：36℃，48h （4）观察指标：若产气则报告大肠菌群阳性。 当前19页，总共37页。 大肠菌群数测定 实验步骤 2.分离培养 （1）制备伊红美蓝平板： 45 ℃，无菌，倾注，15ml （2）选产酸产气的发酵管 （3）接种至伊红美蓝平板 分区划线法 （4）培养： 36℃，48h 当前20页，总共37页。 分离培养 器材与试剂 初发酵结果（4只发酵管）、酒精灯、接种环、伊红美兰平板培养基 当前21页，总共37页。 分区划线法 第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环 当前22页，总共37页。 分区划线