NK细胞分析和总结.docx

自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)是机体重要的免疫细胞， 不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。 NK 细胞的来源 NK 细胞确切的来源还不十分清楚，一般认为直接从骨髓中衍生，其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明，胸腺细胞在体外 IL-2 等细胞因子存在条件下培养也可诱导出 NK 细胞。小鼠脾脏在体内 IL-3 诱导下可促进 NK 细胞的分化。NK 细胞主要分布于外周血中，占 PBMC 5～10％，淋巴结和骨髓中也有 NK 活性，但水平较外周血低。由于 NK 细胞具有部分 T 细胞分化抗原，如 80～90％NK 细胞 CD2+，20～30％NK 细胞CD3+(表达 CD3 链)，30％NK 细胞 CD8+(α /α )和 75～90％NK 细胞 CD38+,而且 NK 细胞具有 IL-2 中亲和性受体，在 IL-2 刺激下可发生增殖反应,活化 NK 细胞可产生 IFN-γ ，因此一般认为 NK 细胞与 T 细胞在发育上关系更为密切。 NK 细胞的表型 与 T 细胞、B 细胞相比，NK 细胞表面标志的特异性是相对的。人 NK 细胞 mIg-, 部分NK 细胞 CD2、CD3 和 CD8 阳性，表达 IL-2 受体β 链 (P75,CD122)，CD11b/CD18 阳性。目前常用检测 NK 细胞的标记有 CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94 和 LAK-1(见表 7-10)。 最近发现的一种稳定表达在 NK 和 LAK 细胞表面的 LAK-1 分子，120kDa， NK 细胞在 IL-2 条件下培养 20 天 LAK-1 仍为阳性，而 HNK-1(CD57)和 CD16 部分消失。LAK 的杀伤活性可被抗 LAK-1 McAb 所抑制。 表 7-10 检测人 NK 细胞常用的标志表 7-11 NK 细胞和其它细胞毒效应细胞的表面标志(％) NK 细胞的活化 NK 细胞可通过多种途径被活化，包括膜表面的 CD2、CD3 分子和多种细胞因子。 通过 CD3 分子的 链 NK 细胞不表达 TCR/CD3 复合物，但部分 NK 细胞表达 CD3 链，当用 CD16 抗体刺激 NK 细胞活化时， 链发生酪氨酸磷酸化，引起胞浆内 Ca２＋浓度升高，IP3 水平增加，促进细胞因子合成和 ADCC 作用。 通过 CD2 分子 CD2 与 CD58 相互作用或用 CD2 McAb 刺激可活化 NK 细胞，CD3 链发生酪氨酸磷酸化。 自然杀伤细胞刺激因子 自然杀伤细胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor, NKSF) 对 NK 细胞有刺激作用。 IL-2、IL-12、IFN-α 、TNF-α 以及白细胞调节素(leukoregulin, LR) 对 NK 细胞的活化和分化有正调节作用， 体外培养时加入上述细胞因子可明显提高 NK 的杀伤活性。 前列腺素 (PG)E1、E2、D2 和肾上腺皮质激素等对 NK 细胞的活性有抑制作用。 NK 细胞表面具有 IL-2 中亲和性受体，IL-2 诱导 NK 的杀伤活性约需 18～24 小时。此外，IL-2 还可诱导 NK 细胞的增殖，一般在刺激后 3～4 天开始发生增殖，其机理为 IL-2 可诱导 NK 细胞表达 IL-2Rα 链，新表达的α 链与原先细胞表面的β 链和γ 链结合形成高亲和性受体,在IL-2 存在下刺激 NK 细胞发生增殖。IL-2 诱导 NK 细胞的活性机理尚不清楚，可能与增加细 胞粘附分子的表达，提高对 NK 抵抗靶细胞的杀伤活性有关，还可能增加 NK 细胞胞浆中的颗粒以及丝氨酸酯酶 mRNA 的表达，活化和促进杀伤介质的杀伤作用。 NK 细胞的功能 (一)自然杀伤活性 由于 NK 细胞的杀伤活性无 MHC(major histocompatibility complex) 人类主要组织相容性复合体限制，不依赖抗体，因此称为自然杀伤活性。 NK 细胞胞浆丰富，含有较大的嗜天青颗粒，颗粒的含量与 NK 细胞的杀伤活性呈正相关。NK 细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早，在体外 1 小时、体内 4 小时即可见到杀伤效应。NK 细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒感染细胞、某些自身组织细胞(如血细胞)、寄生虫等，因此 NK 细胞是机体抗肿瘤、抗感染的重要免疫因素，也参与第Ⅱ型超敏反应和移植物抗宿主反应。 1. 识别靶细胞 NK 细胞识别靶细胞是非特异性的，这与 CTL 识别靶细胞机理不同，但确切的机理尚未明了。现已知淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1) 与靶细胞表面的细胞间粘附分子 -1(I