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1.革兰染色法 固定 干燥 染色 标本涂片 镜检 初染——结晶紫 媒染——卢戈碘液 脱色——无水乙醇 复染——稀释复红 紫色:革兰阳性菌;红色:革兰阴性菌 意义:鉴别细菌、选择抗菌药物、研 究细菌致病性 革兰染色结果比较 革兰阳性菌 (葡萄球菌) 革兰阴性菌 (大肠杆菌) (二)复染法 2.抗酸染色法 固定 干燥 染色 标本涂片 镜检 初染——苯酚复红(加温) 脱色——95%盐酸酒精 复染——亚甲蓝 红色:抗酸性细菌;蓝色:非抗酸性细菌 抗酸杆菌染色结果 抗酸杆菌呈红色,非抗酸杆菌及背景呈蓝色 (二)复染法 3.特殊染色法 细菌的结构如鞭毛、荚膜、芽胞、细胞壁及异染颗粒等,用上述染色法不易着色,须用特殊染色法才能着色。这些染色法使细菌的特殊结构与菌体染成不同颜色,有利于观察和鉴别细菌。 细菌的大小与形态 计量单位:微米(μm) 形态:球菌、杆菌、螺形菌 细菌的结构 基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞 细菌形态检查法 革兰染色法 抗酸染色法 一、名词解释 1.质粒 2.L型细菌 3.荚膜 4.鞭毛 5.芽胞 二、简答题 1.试比较革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁的化学组成及结构。 2.简述青霉素、溶菌酶、红霉素、链霉素的抑菌机制。 3.试述革兰染色的方法、步骤及意义。 一、细菌的基本结构 (一)细胞壁(cell wall) 位于菌细胞的最外层,包绕在细胞膜的周围。 组成较复杂,随不同细菌而异。用革兰染色法可将细菌分为两大类,即革兰阳性菌(G+ )和革兰阴性菌(G-)。 G+ G- 1.功能 维持菌体固有形态,并保护细菌抵抗低渗环境 参与物质交换 决定细菌抗原性 与致病性有关 2.细胞壁主要成分 共有组分:肽聚糖 (1)革兰阳性菌细胞壁 肽聚糖、磷壁酸构成三维立体结构,坚固,15~50层 ①肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥 ②磷壁酸:是革兰阳性菌细胞壁特有组分。分为壁磷壁酸和膜磷壁酸两种 ③蛋白质:与致病有关 革兰阳性菌细胞壁的肽聚糖结构 (2)革兰阴性菌细胞壁 ①肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链构成二维平面结构,1~2层 ②外膜:是革兰阳性菌细胞壁特有组分。 由内向外依次为脂蛋白、脂质双层和脂多糖(LPS)。脂多糖即革兰阴性菌的内毒素,也称为热原质, 革兰阴性菌细胞壁的肽聚糖结构 G+菌与G-菌肽聚糖结构比较 G+ G- G+菌与G-菌细胞壁结构比较 细胞壁结构 G+菌 G-菌 肽聚糖组成 聚糖骨架、四肽侧链、五肽桥 聚糖骨架、四肽侧链 肽聚糖厚度 可达50层 仅1-2层 肽聚糖含量(占细胞壁干重) 50%-80% 5%-10% 坚韧度 坚韧 疏松 磷壁酸 + - 外膜 - + 青霉素、溶菌酶 敏感 不敏感 3.细胞壁缺陷型,又称细菌L型(bacterial L form) 细胞壁受损的细菌能够生长和分裂者 高度多形性,生长缓慢 油煎蛋状菌落 某些L型引起慢性感染 (二)细胞膜(cell membrane) 半透性薄膜 功能 渗透和运输作用 生物合成 呼吸作用 形成中介体 中介体 (mesosome) 细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状 多见于G+细菌 参与细菌分裂 (三)细胞质(cytoplasm) 细胞膜包裹的溶胶状物质,或称原生质。 1.质粒(plasmid):是染色体外的遗传物质,为闭合环形的双股DNA,存在于细胞中。质粒是细菌生命活动非必需基因,但控制着某些特殊的遗传性状,如性菌毛、毒素、细菌素和耐药性等。质粒具有自主复制、传给子代、丢失及在细菌之间转移等特性,与细菌的遗传变异有关。 2.核糖体(ribosome):原核细胞中唯一的细胞器,是蛋白质合成的场所。沉降系数为70S,由50S和30S两个亚基组成,真核细胞的核糖体体积较大,沉降系数为80S,由60S和40S两个亚基组成。 链霉素能与30S小亚基结合,红霉素能与50S大亚基结合,干扰蛋白质合成导致细菌死亡,但是不能与真核细胞的核糖体结合,因此对人体细胞无影响。 (三)细胞质 3.胞质颗粒(cytoplasmic granules):多为贮藏的营养物质。异染颗粒是胞质颗粒的一种,亚甲蓝染色呈紫色,常见于白喉棒状杆菌,位于菌体两端,故又称极体,有助于细菌的鉴别。 (四)核质(nuclear material) 细菌的遗传物质称为核质或拟核。核质控制着细菌的生命活动,是细菌遗传变异的物质基础。 双股环状DNA分子组成 球形、棒状或哑状 二、细菌的特殊结构 (一)荚膜(capsule) 某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘液性物质,一般为多糖或多肽组成。厚度≥0.2μm称为荚膜,厚度< 0.2μm称微荚膜(
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