微生物菌种高通量筛选技术与装置.pptxVIP

微生物菌种高通量筛选技术与装置.pptx

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华东理工大学 国家生化工程技术研究中心(上海) 王永红 ;内容提纲;高通量筛选在微生物育种中的重要意义 ;青霉素:5万——12万 u/ml(国内) 8万——20万 u/ml(国外) 红霉素:5000——8000/10000 u/ml(国内) 10000——15000 u/ml(国外) 阿维菌素:4000——8400 u/ml(国内) 10000 u/ml 以上(国外); 育种工作中两大任务:突变与筛选 ;突变仅是前提 筛选才是关键; 我国现有菌种筛选仪器装备与技术国际相比存在巨大差距 我国:传统方法,筛选方式半个世纪没有明显改进 国际:高通量筛选技术(High throughput screening, HTS) ;内容提纲;1929,1940s-1950s Pfizer公司:土霉素的发现 56名科学家、10万份土样、历时1年 25%市场 1984年,Pfizer提出Automation Project. 1990年,在Nagoya, Japan实施 1万株份/周;;微生物菌种筛选仪器装备发展趋势: 自动化、微型化、高通量 培养基灭菌、分装;倒平板;挑取单菌落、接种;培养;目的产物抽提;测定;数据收集处理等过程 单元自动化与系统集成自动化(通量匹配);;全自动培养基分装系统;;4600个克隆/小时;培养;出发株;;出发株;;2056 valves , 256 compartments containing bacterial expressing an enzyme;动物细胞培养用微型反应器;第23页,共65页。;第24页,共65页。;第25页,共65页。;左图4.9×2.3×2.2 m,整个箱体有温湿度控制,箱体内,条形码阅读器、盖板站、封板器、液体处理装置、摇床、光度计、离心机、冷藏室等。平行地实现样品准备、运行、监控768个(16个48孔板)。;Orbitor工作站;Orbitor结构剖解;操作灵活性;内容提纲;高通量筛选技术;对高通量筛选技术存在认识上的误区;菌种高通量筛选技术组成;分析测试;菌种高通量筛选技术;红霉素生产菌株的微型化培养及分析;微型化培养;微型化培养--动力学参数比较;流场特性;OTR 与混合;微型化培养--发酵参数比较 ;微型化培养--发酵参数比较 ;微型化培养--装置图;微型化分析;生物检测法;微型化分析--生物检测法;微型化分析--生物检测法;微型化分析--生物检测法;微型化分析--化学检测法;微型化分析--化学检测法;微型化分析--化学检测法;高通量(微型化)抗生素效价分析方法;微型化平台??用;高通量培养技术;可灭菌、 重复使用寿命长、 成本低、 易清洗、 能统一标准、 防交叉污染、 透气性好、 防止水分蒸发;微孔板固定架;多通道可调深孔板取样适配器;专用菌落琼脂柱打孔器;微型化平台应用;微型化平台应用;微型化平台应用;总结:高通量筛选技术的优势(1);总结:高通量筛选技术的优势(2);总结:高通量筛选技术的优势(3);谢谢!

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