《DNA重组技术的基本工具》讲稿.pptxVIP

一、基因工程的概念： 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。;1.限制酶和DNA连接酶的作用分别是什么?;问题探讨：;2.为什么限制酶和DNA连接酶在微生物中能够分离到,而高等植物和动物中没有?; 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是生物在长期的进化过程中形成了完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。 限制性核酸内切酶就是细菌的防御性工具，当外源DNA侵入时，限制性核酸内切酶会将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。 所以，限制性核酸内切酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而保护自身的作用。;;如何切割DNA分子呢？;一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;限制酶的识别序列：;　;　;什么叫黏性末端？;;要想获得目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？;模型构建1;二、“分子缝合针” —— DNA连接酶; 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，;　;模型构建2;③类型：;2．DNA连接酶 (1)常用的DNA连接酶;.DNA聚合酶与DNA连接酶是同一种酶的不同名称吗?;三、“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体;2、作用 将外源DNA携带进受体细胞后，停留在细胞中进行自我复制或整合到染色体上，随染色体DNA进行同步复制。质粒DNA分子上有特殊的遗传标记基因，如抗四环素、氨苄青霉素等标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。; 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒， 其中常含有抗药基因，如四环素的 标记基因。质粒的存在与否对受体 细胞生存没有决定性作用，但复制 只能在受体细胞内完成。;;习题:已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因,现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么?请设计实验、预期实验结果，并得出相应的实验结论;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;为什么限制酶不能将自己的DNA分子剪切掉？